引言

高架十字迷宮測試最初是為了檢測嚙齒動物的情緒反應而建立的。整個裝置通常位于離地面500毫米的高度，由兩個開放的和兩個封閉的臂組成一個十字形。在觀察期間，記錄動物在每個臂上的探索行為（包括持續(xù)時間和進入次數(shù)）、行走距離，以及特定行為，如實驗動物的頭部探索行為。通過這些測量，動物的焦慮程度作為實驗結果被估計。以下是一份高架十字 迷宮的實驗協(xié)議。

一、實驗動物

所有實驗程序均需獲得實驗所在區(qū)域動物護理和使用委員會的批準。

從實驗動物公司購買小鼠。

實驗行為開始前至少一周，以每個標準小鼠籠4只動物的小組形式飼養(yǎng)，并鋪設紙墊料。

動物房間保持標準環(huán)境條件，包括光照（12:12光/暗周期，燈光在10:00點開啟）、室溫（25.0 ± 0.5°C）、濕度（55 ± 10%）和通風（每小時10次）。

動物可自由取食和水。

二、實驗設備

VisuTrack動物行為學分析軟件

搭建好十字形鋁型材框架，并安放十字迷宮宮體。十字迷宮宮體包括兩個開放通道（35厘米×5厘米）和兩個相同尺寸的封閉通道，通道高度為10厘米，中央?yún)^(qū)域（5厘米×5厘米）連接四個臂。為了防止小鼠從開放通道上掉下來，開放臂兩端設置了一條突出的邊緣（3毫米厚，3毫米高）。

宮體由白色亞克力板組成，并配置黑色底板以便分析小白鼠。閉臂墻壁默認為不透明乳白色的墻壁（也有一些閉臂是透明的，但會對小鼠焦慮水平的檢測產(chǎn)生影響，后續(xù)會撰文說明），宮體距地面不低于550毫米且高度可調(diào)。

在容器頂部設置照明，以照亮迷宮表面到所需的光強度。

在十字迷宮支架中央上安裝數(shù)字視頻攝像機，以實時視頻監(jiān)控行為測試。

三、實驗流程

1.每天在固定的時間段測試1小鼠，以避免可能受晝夜變化影響的血漿皮質的醇水平。

2.調(diào)整每個臂部遠端和中心平臺表面的光照強度至約100勒克斯。

3.在每次測試前，用70%乙醇溶液清潔整個裝置，并用蒸餾水擦拭。

4.點擊VisuTrack軟件上的“開始播放”按鈕，啟動將記錄小鼠行為的攝像機，并把測試時間設置為5分鐘。

5.將一只動物放置在面向開放臂的中心平臺上，并在軟件中點“開始分析”，允許小鼠在高架十字 迷宮里自由探索，點擊“開始分析后”軟件5分鐘自動停止分析，并自動生成老鼠的運動軌跡圖和運動數(shù)據(jù)。

6.將測試過的動物送回飼養(yǎng)后，手動計算糞便和尿液的數(shù)量，這是因為小鼠排泄物可以側面的反映出老鼠的焦慮水平。

7.重復步驟3-6重復至所有小鼠實驗結束。

四、測試指標

高架十字 迷宮測試主要衡量以下幾個參數(shù)，這些參數(shù)可以被用來評估動物的焦慮水平和探索行為：

開放臂進入次數(shù)：這個參數(shù)衡量的是動物進入開放臂的頻次。動物越愿意進入開放的臂，表明其焦慮程度越低。

封閉臂進入次數(shù)：這個參數(shù)衡量的是動物進入封閉臂的頻次。動物更傾向于進入封閉的臂，可能表明其焦慮程度較高。

開放臂停留時間：這個參數(shù)衡量的是動物在開放臂的停留時間。在開放臂停留的時間越長，表明動物的焦慮程度越低。

封閉臂停留時間：這個參數(shù)衡量的是動物在封閉臂的停留時間。在封閉臂停留的時間越長，可能表明動物的焦慮程度較高。

總探索時間：這個參數(shù)衡量的是動物在迷宮中的總探索時間。這可以用來評估動物的活躍度和探索行為。

下面是一些常用的公式，用于從高架十字迷宮測試中獲取有意義的數(shù)據(jù)：

開放臂進入的百分比：(開放臂進入次數(shù) / 總進入次數(shù)) * 100%

封閉臂進入的百分比：(封閉臂進入次數(shù) / 總進入次數(shù)) * 100%

開放臂停留的百分比：(開放臂停留時間 / 總探索時間) * 100%

封閉臂停留的百分比：(封閉臂停留時間 / 總探索時間) * 100%