DMEM 培養基
參考價 | ¥1-¥3600/瓶 |
- 公司名稱 上海谷研實業有限公司
- 品牌其他品牌
- 型號
- 所在地上海市
- 廠商性質經銷商
- 更新時間2025/3/19 13:32:59
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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 500ml |
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貨號 | GOY-XP3090 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品屬性:
產品名稱 | DMEM 培養基 | 規格 | 500ml |
英文名稱 | DMEM Medium ,DMEM培養基 | 貨號 | GOY-XP3090 |
MEM是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養基,是在MEM培養基的基礎上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量,同時又分為高糖型(4500mg/L)和低糖型(1000mg/L)。
DMEM是 dulbecco's modified eagle medium的縮寫,所以其特點主要包括以下:
(1)氨基酸含量為依格爾培養基的2倍,且含有非必需氨基酸,如等;
(2)維生素含量為依格爾培養基的4倍;
(3)含有糖酵解途徑中的重要物質——丙酮酸;
(4)含有微量的鐵離子。
注意事項:
僅限科研用。
培養體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,請不要用暴露的皮膚接觸培養體系的液體和有培養體系的液體殘留的容器內部;這部分有害物質的濃度和危害性都較低,如有接觸,立即用自來水沖洗即可。
細胞實驗步驟:
一、細胞復蘇
1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺,紫外燈照射30min后再通風30min;
2.預熱培養基;
3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
4.將凍存細胞從液氮罐中取出;
5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化;
6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
7.吸取9ml培養基到50ml離心管中;
8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中;
9.1000r/min,離心5min;
10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
11.吸棄上清液;
12.吸取1ml培養基重懸細胞,將細胞懸液轉移到培養瓶內,補加適量培養基,輕輕晃動培養瓶使細胞分布均勻,并做好標記;
13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態;
14.將細胞放回二氧化碳培養箱中靜置培養。
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細胞培養步驟:
?細胞復蘇?:
從液氮罐中取出凍存細胞,迅速放入37℃水浴中解凍。
解凍后,將細胞轉移到含有新鮮培養基的培養皿中,輕輕搖動使細胞均勻分布。
放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。
?細胞換液?:
吸除或倒掉培養皿內的舊培養液。
加入PBS緩沖液,輕輕漂洗細胞,以去除懸浮在細胞表面的碎片,重復幾次。
加入新的培養基。
?細胞傳代?:
當細胞長到80%~90%時,進行傳代。
吸除或倒掉瓶內舊培養液,加入PBS緩沖液漂洗。
加入消化液,輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。
將培養瓶放入37℃培養箱中靜止幾分鐘,觀察細胞變化。當細胞間隙增大后,加入含有血清的培養液終止消化。
吹打細胞使其成為懸液,轉移到離心管中離心。
棄上清,加入適量的細胞培養液重懸細胞。
按比例分裝到新的培養皿中,補加新鮮培養基。
做好標記,放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。
?細胞凍存?:
選擇對數生長期的細胞進行凍存。
將細胞轉移到離心管中離心,棄上清。
加入適量的凍存液(如90%的培養基+10%的DMSO),輕輕吹打重懸細胞。
將細胞轉移到冷凍保存管中,標記后放入程序降溫盒,再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。