諾博萊德 酵母線粒體提取試劑盒

酵母線粒體提取試劑盒 蛋白提取

產(chǎn)品貨號(hào)：P5136

產(chǎn)品名稱：酵母線粒體提取試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡介：

中文名稱：酵母線粒體提取試劑盒

規(guī)格：100T ; 50T

儲(chǔ)存條件：2-8℃，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder P5136 酵母線粒體提取試劑盒

適用樣本：酵母

注：

1. 酵母洗滌液長期不用可以-20℃保存。

2. 試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完！

產(chǎn)品簡介：

線粒體(mitochondria)是真核細(xì)胞中產(chǎn)生能量的重要細(xì)胞器。細(xì)胞中的能源物質(zhì)—脂肪、糖、部分氨基酸在此進(jìn)行最終的氧化，并通過偶聯(lián)磷酸化生成ATP，供給細(xì)胞生理活動(dòng)之需。對(duì)線粒體結(jié)構(gòu)與功能的研究通常是在離體的線粒體上進(jìn)行的。

酵母線粒體提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種酵母樣品中提取線粒體。提取過程簡單方便。

本試劑盒不能用于冷凍樣品的線粒體提取。

自備試劑和儀器：

離心機(jī)、振蕩器、渦旋混勻器、移液器、冰箱、冰盒、PBS緩沖液、離心管、吸頭、一次性手套

使用方法：

一、使用注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得優(yōu)良實(shí)驗(yàn)效果

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失。

3. 實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。

二、酵母線粒體提取：

1. 酵母培養(yǎng)物，在4℃，1000×g 條件下離心5-10 分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集酵母沉淀。

2. 用PBS洗滌酵母兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。

3. 每100μl 體積或100mg濕重酵母沉淀物中加入400μl酵母線粒體提取液A，混勻后，在30℃條件

下保溫 15 分鐘。

4. 在1000×g 條件下離心 5-10 分鐘，收集酵母沉淀。

5. 用300μl 酵母洗滌液D洗滌酵母一次，離心收集酵母。

6. 酵母沉淀物中加入500μl 酵母線粒體提取液B，充分混勻后。

7. 在37℃或室溫條件下輕微振蕩60-90分鐘。

8. 在2000×g 條件下離心5-10分鐘，棄上清，收集沉淀。

9. 沉淀用300μl酵母洗滌液D洗滌兩次。離心收集沉淀。

10. 在沉淀中加入400μl酵母線粒體提取液C，充分混勻，然后在振蕩器上振蕩10-30分鐘。

11. 在4℃，500×g條件下離心5分鐘，棄沉淀，收集上清。

12. 將上清吸入另一干凈離心管。

13. 在4℃，12000×g條件下離心20分鐘。棄上清，收集沉淀。

14. 在沉淀中加入400μl線粒體保存液 E，混勻。

15. 在4℃，12000×g條件下離心20分鐘。棄上清，收集沉淀。即得到酵母線粒體樣品。

16. 根據(jù)下游實(shí)驗(yàn)需要，將沉淀用相應(yīng)的緩沖溶液重懸。置冰箱備用或直接用于下游實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)：

1. 本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并che底清除殘留清潔劑。

3. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

4. 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

5. 如果試劑不小心接觸皮膚或眼睛，應(yīng)立即用水沖洗。

酵母線粒體提取試劑盒 蛋白提取

產(chǎn)品訂購信息：

P5136  酵母線粒體提取試劑盒  50T/100T