中性、堿性土壤速效磷試劑盒說明書

微量法 100T/96S

中性、堿性土壤速效磷試劑盒

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

速效磷是土壤中可被植物吸收的磷組分，包括全部水溶性磷、部分吸附態磷及有機態磷，土壤中速效磷是限制植物生長主要因子之一。

測定原理：

用弱堿性提取堿溶性磷和吸附態磷，用鉬銻抗比色法測定。

試劑組成和配制：

試劑二： 粉劑×1 支，4℃避光保存。臨用前加 2ml 蒸餾水溶解。用不完的試劑 4℃保存。試劑三： 粉劑×3 支，4℃避光保存。臨用前加 1ml 蒸餾水溶解。現配現用。

自備儀器和用品：

天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、震蕩儀。

樣本處理：

新鮮土樣風干，過 30-50 目篩，按照土壤質量（g）：提取液體積(ml)為 1：20 的比例（建議稱取約 0.05g土樣，加入 1ml 提取液），振蕩提取 1h，10000g ，25℃離心 10min，取上清液待測。

測定步驟：

1、取試劑三一支，加入 1ml 蒸餾水充分溶解待用。

2、顯色液的配制（可測 50 個樣）：取EP 管一支，加入 660μl 試劑一，再加入 100μl 試劑二，充分混勻后，再加入 240μl 試劑三，充分混勻待用；配好的顯色液應為黃色，若變藍則為磷污染；顯色液必須現配現用；若一次性測不了 50 個樣，可按比例縮小各試劑體積。

3、操作表：

注意事項：

1、配好的顯色液當天用完，變藍則不能使用。

2、最di檢出限為 0.2μg/ml。

計算公式：

用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準曲線：y = 0.1164x-0.012，R2 = 0.9958，x 為標準品濃度（mg/L），y 為吸光值。速效磷含量（mg/kg 干重）=（△A+0.012）÷ 0.1164×V 樣÷（W×V 樣÷V 樣總）= 8.591×（△A+0.012）÷W

V 樣：加入反應體系中樣本體積，0.04ml；V 樣總：加入提取液體積，1ml，W：樣本質量，約 0.05g

用 96 孔板測定的計算公式如下

標準曲線：y = 0.0582x-0.012，R2 = 0.9958，x 為標準品濃度（mg/L），y 為吸光值。

速效磷含量（mg/kg 干重）=（△A+0.012）÷ 0.0582×V 樣÷（W×V 樣÷V 樣總）

= 17.182×（△A+0.012）÷W

V 樣：加入反應體系中樣本體積，0.04ml；V 樣總：加入提取液體積，1ml，W：樣本質量，約 0.05g