EV-Save™ 細胞外囊泡吸附抑制劑WAKO

EV-Save™ 細胞外囊泡吸附抑制劑WAKO

各品牌都將脂質、核酸或細胞膜的熒光標記試劑加以改造，使之成為包括外泌體在內的細胞外囊泡的特異熒光標記試劑。該標記方法是讓從各個樣品中分離、提取出來的外泌體樣品與熒光色素進行反應，通過凝膠過濾或超濾裝置去除未反應的熒光色素。在該熒光標記的過程中，特別是去除未反應的熒光標記時，會因吸附而損失大量的外泌體樣品，同時，通過向外泌體樣品添加FUJIFILM Wako開發(fā)的EV-Save™ Extracellular Vesicle Blocking Reagent（下面簡稱EV-Save），能強烈抑制吸附損失（圖1）。用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS從COLO201細胞培養(yǎng)上清中分離、提取外泌體樣品，先用A公司的熒光標記試劑進行標記，然后用B公司的凝膠過濾柱去除未反應色素。將獲得的熒光標記外泌體樣品加入HeLa細胞培養(yǎng)上清中，經過24小時的細胞吸收后，用熒光顯微鏡及流式細胞儀檢測。在熒光色素標記時預先向樣品中加入EV-Save，結果顯示，細胞內的熒光信號比未添加EV-Save時大幅增強（圖1、A, B）。用PS Capture™ Exosome ELISA Kit后再比較凝膠過濾前后外泌體樣品的吸附損失， 未添加EV-Save的樣品在凝膠過濾后沒被檢測到外泌體表面標記物CD63的信號，而添加了EV-Save的樣品則檢測到了CD63的信號，所以，EV-Save能有效抑制凝膠過濾引起的吸附損失（圖1、C）。

圖1．熒光標記外泌體樣品的吸收確認與EV-Save抑制吸附損失的效果

用A公司的熒光標記試劑對MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS分離的COLO201來源外泌體樣品（1 ×10¹⁰ particles）進行標記后，再用熒光顯微鏡（A）和流式細胞儀（B）確認HeLa細胞吸收外泌體樣品的情況。

準備同上的外泌體樣品（5 × 10⁹ particles），可以用PS Capture™ Exosome ELISA Kit比較CD63信號來檢測凝膠過濾前后的損失（C）。

通過FUJIFILM Wako PS親和法和超離法從相同量的培養(yǎng)上清樣品中分離、提取出外泌體樣品，再用A公司的熒光標記試劑標記外泌體樣品，進行細胞吸收外泌體的確認實驗（圖3）。熒光顯微鏡的分析結果表明，受體細胞吸收的由超離法分離、提取出的外泌體樣品比PS親和提取的外泌體樣品更多（圖3、A）。但是，詳細分析提取外泌體樣品時，盡管蛋白濃度和粒子數(shù)分析顯示出超離樣品含有更多的外泌體量，但是如果用PS Capture™ Exosome ELISA Kit檢測外泌體標記物CD63信號，PS親和法分離、提取的樣品比用超離法分離、提取的外泌體樣品的一個粒子的CD63信號和純度更高（圖3、B）。使用雜質多、污染嚴重的超離法制備外泌體樣品時，受體細胞吸收的信號實體不僅來源于外泌體，也可能來源于雜質蛋白。

019-19741NAAnti lb al， Rabbit(for Immunocytochemistry)小膠質細胞/巨噬細胞特異性蛋白抗體（免疫組化）for Immunochemistry50ug"Application

小膠質細胞I bal抗體

019-19741發(fā)表文獻多，業(yè)內口碑佳

兔源、鼠源、山羊源"

016-20001NAAnti lb al， Rabbit(for Western Blotting)小膠質細胞/巨噬細胞特異性蛋白抗體（免疫印跡）for Immunochemistry50ug"Application

小膠質細胞I bal抗體

019-19741發(fā)表文獻多，業(yè)內口碑佳

兔源、鼠源、山羊源"

013-26471NA"Anti lb al， Rabbit， Red Fluorochrome

(635) -conjugated"小膠質細胞/巨噬細胞特異性蛋白抗體（結合紅色熒光素635）for Immunochemistry 100uL"Application

小膠質細胞I bal抗體

019-19741發(fā)表文獻多，業(yè)內口碑佳

兔源、鼠源、山羊源"

013-27593NA"Anti Human I bal， Monoclonal Antibody

(NC NP 27)"抗人 Iba1，單抗（NCNP27）for Immunochemistry50uL"Application

小膠質細胞I bal抗體

019-19741發(fā)表文獻多，業(yè)內口碑佳

兔源、鼠源、山羊源"

016-26721NAAnti lb al， Monoclonal Antibody(NC NP 24)抗Iba1，單克隆抗體（NCNP24）（鼠源）for Immunochemistry50uL"Application

小膠質細胞I bal抗體

019-19741發(fā)表文獻多，業(yè)內口碑佳

兔源、鼠源、山羊源"

011-27991NAAnti lb al， Goat抗Iba1，山羊源多克隆抗體for Immunochemistry100uL"Application

小膠質細胞I bal抗體

019-19741發(fā)表文獻多，業(yè)內口碑佳

兔源、鼠源、山羊源"

018-27283NAAnti GFAP， Monoclonal Antibody(MO 389)抗GFAP，單克隆抗體（MO389）for Immunochemistry50jL鼠源單抗，星形膠質標記

010-26883NAAnti Amyloidβ， Monoclonal Antibody(BNT 77)β淀粉樣蛋白，單抗(BNT77)for Immunochemistry50uL阿爾茨海默研究用

014-26923NAAnti Amyloidβ40， Monoclonal Antibody(BA 27)抗β-淀粉樣蛋白40，單克隆抗體（BA27）for Immunochemistry 50uL阿爾茨海默研究用

010-26903NA"Anti Amyloidβ42(43) ， Monoclonal Antibody

(BC05)"抗β-淀粉樣蛋白42（43），單克隆抗體（BC05）for Immunochemistry50uL阿爾茨海默研究用

013-26873NA"Anti Human Amyloidβ， Monoclonal Antibody

(BAN 50)"抗人β-淀粉樣蛋白，單克隆抗體（BAN50）for Immunochemistry50uL阿爾茨海默研究用

015-25191NA"Anti Phosphorylated a-Synuclein， Monoclonal

Antibody(pSy n#64)"抗磷酸化α-突觸核蛋白單克隆抗體 （pSyn#64）for Immunochemistry50uL帕金森癥研究用

060-01081NAFast Violet B Salt固紫B鹽Wako Special Grade1.5g骨髓基質細胞(BMSC) 特異性染色

038-01045NACanada Balsam加拿大樹膠Wako 1st Grade500g標本制作

192-16301NASoft mount?SoftMount®無毒型封片劑for Pathology Research 250mL無毒封片劑，可以替代二甲苯

190-18661NASuper Clear MountSuper Clear Mount 封片劑for Cellbiology10mL熒光蛋白用封片劑

294-67001NATRAP/ALP stain kitTRAP/ALP雙重染色試劑盒for Pathology Research60 tests成骨細胞、破骨細胞雙重染色

290-62601NAHuman/Rat Beta Amyloid(42) ELISA Kit Wako人/鼠淀粉樣蛋白（42）ELISA試劑盒for Immunochemistry96 tests阿爾茨海默病研究用，靈敏度高，檢測樣品種類多

292-64501NA"Human/Rat Beta Amyloid(42) ELISA Kit Wako，

High Sensitive"人/鼠淀粉樣蛋白（42）ELISA試劑盒，高靈敏度for Immunochemistry96 tests阿爾茨海默病研究用，靈敏度高，檢測樣品種類多

298-80101NA"High Molecular AmyloidβOligomer ELISA Kt

Wako"高分子β淀粉樣蛋白寡聚體ELISA試劑盒Wakofor Immunochemistry96 tests阿爾茨海默病研究用，靈敏度高，檢測樣品種類多

296-80401NATau ELISA Kit WakoTau ELISA試劑盒for Immunochemistr96 tests阿爾茨海默病研究用，靈敏度高，檢測樣品種類多

298-81701NAPhosphorylated TauT181ELISAKitWako磷酸化Tau T181 ELISA試劑盒for Immunochemistry96 tests阿爾茨海默病研究用，靈敏度高，檢測樣品種類多

025-18921NABE S-So(Cell-im permeant)BES-SO（非細胞透過性）for Cellbiology1mg適用于炎癥、腦神經、腫瘤等相關研究

021-17801 936356-51-3BE S-So-AM超氧化物陰離子特異性熒光探針for Cellbiology1mg適用于炎癥、腦神經、腫瘤等相關研究

025-15481NABE S-ThioThio/Serenol選擇性探針for Cellbiology1mg適用于炎癥、腦神經、腫瘤等相關研究

028-17811728912-55-8BE S-H， O， -Ac過氧化氫特異性熒光探針for Cellbiology1mg適用于炎癥、腦神經、腫瘤等相關研究