固紫B鹽 WAKO經銷商

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有研究表明，骨髓基質細胞（BMSC）在調控造血、組織修復及一些疑難疾病的治療中具有重要意義。然而BMSC并不具備典型形態特征，且骨髓涂片中數量甚少，傳統的wright-Giemsa法染色后于普通光鏡下不易識別。應用單克隆抗體技術結合流式細胞儀、免疫細胞化學染色、熒光標記技術等可將其鑒別，但亦各有其局限性。

　　為此，龔旭波等人建立了將固紫B鹽應用于BMSC的特異性細胞化學染色方法。該方法簡便快速，整個操作過程僅需30 min，染色明顯，對陳舊標本也易著色，染色液配置后可較長時間保存，染色結果保留數月也不褪色，表明固紫B鹽對BMSC染色具有較高的穩定性、特異性。

◆實驗步驟

1．標本采集

吸取患者骨髓、胸腔積液或腹腔積液50 μL制成涂片。

2．溶液配制

固定液：95％乙醇溶液34.5 mL，40％溶液5.5 mL，蒸餾水1 mL混合而成；

1 g/L固紫B鹽PBS溶液：50 mg固紫B鹽粉末溶于50 mL PBS溶液，pH 7.2~7.6，4℃下保存；

蘇木精復染液：蘇木精2 g溶于250 mL無水乙醇中，硫酸鋁10 g溶于750 mL蒸餾水中，兩種溶液混合后加熱煮沸

蘇木精復染液：2 min，再加入0.5 g碘酸鈉和1 g檸檬酸，混勻。

3．固紫B鹽染色

上述新鮮干燥標本于固定液固定30 s，小水流沖洗后晾干，置入1 g/L固紫B鹽PBS溶液（pH 7.2~7.6），37℃水浴箱內置30 min，流水沖洗1 min，晾干后蘇木精復染2 min，流水沖洗，待干。鏡下觀察細胞的著色情況及陽性BMSC形態特征。

◆染色效果

圖a~d: 骨髓涂片

a~d圖箭頭所示為骨髓基質細胞胞質染為紫紅色，胞核不著色，而其他細胞均無此染色特征（固紫B鹽染色x1000）

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