HG-HCP003 CHO HCP ELISA檢測試劑盒
參考價 | ¥ 10250 |
訂貨量 | ≥1件 |
- 公司名稱 柏萊源(天津)生物科技有限公司
- 品牌 譜新生物
- 型號 HG-HCP003
- 產地
- 廠商性質 經銷商
- 更新時間 2025/4/10 11:10:22
- 訪問次數 79
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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 96T |
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應用領域 | 生物產業,制藥/生物制藥 |
CHO HCP ELISA 檢測試劑盒說明書
貨號:HG-HCP003
產品簡介:
BlueKit系列系列蛋白A(Protein A)ELISA檢測試劑盒是用于定量檢測生物制品中蛋白A殘留量的專用試劑盒。
本試劑盒采用雙抗夾心法,用捕獲抗體包被96孔酶標板,制成固相抗體,隨后加入標準品和檢測樣品,再加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的酶標抗體,形成一個固相抗體-蛋白A-酶標抗體的三明治結合物,反應結束后洗滌,然后加入底物進行顯色反應,底物在HRP的催化下由無色轉變成藍色,并在終止液的作用下轉變成最終的黃色。在450nm和630nm波長下測定其吸光度值(OD值),其中630nm為校正波長。OD值與樣品中的蛋白A含量呈正相關。
檢測范圍:1.56-100 ng/mL
定量限:1.56 ng/mL
規格:
96T
應用:
適用于生物制品純化工藝過程的優化、中間工藝過程的雜質控制以及終產品的放行檢測。
試劑盒組成:
組分 | 規格 | 配制 |
CHO-K1 HCP標準品(5μg/mL) | 100μL×1管 | 用稀釋液1進行梯度稀釋 |
包被酶標板Coated Plate | 8孔×12條 | 即用型 |
稀釋液1 Dilution Buffer 1 | 50mL×1瓶 | 即用型 |
稀釋液2 Dilution Buffer 2 | 30mL×1瓶 | 即用型 |
濃縮洗液Wash Buffer(20×) | 50 mL×1瓶 | 用超純水進行20倍稀釋 |
檢測抗體Detection Antibody(50×) | 300μL×1管 | 用稀釋液2進行50倍稀釋 |
酶結合物Streptavidin-HRP(100×) | 300μL×1管 | 用稀釋液2進行100倍稀釋 |
TMB顯色液TMB Substrate | 12 mL×1瓶 | 即用型 |
終止液Stop Solution | 10 mL×1瓶 | 即用型 |
封板膜Sealing film | 5張 | 即用型 |
說明書 | 1份 | 即用型 |
備 注:所有組分存儲溫度均為 2~8℃,有效期12個月。
需自行準備的材料
◆酶標儀
◆去離子水
◆微孔板恒溫振蕩器
◆全新濾紙
◆微量移液器及吸頭
◆渦旋振蕩器
實驗前準備
1.所有試劑以及待測樣本需要恢復室溫(18-25℃)。所有試劑現配現用。
2.1× 洗液配制:濃縮洗液平衡至室溫(18-25℃),不要有結晶?;靹蚝蟾鶕昧浚∵m量用超純水按 1:19 的比例,將20× 洗液稀釋 20 倍,最終得到 1×洗液。
3.1x 檢測抗體配制:50× 檢測抗體充分溶解后,離心,然后用稀釋液 2 以 1:49 的比例進行稀釋。備注:若需同時使用多瓶校準品,請分別溶解后轉移至 1.5 mL 無菌離心管,振蕩混勻后使用;若每瓶校準品復溶液涉及多次凍融,建議采用 1.5 mL 無菌離心管酌量分裝后在≤ -18 ℃保存。
4.1× 酶結合物配制:100× 酶結合物充分溶解后,離心,然后用然后用稀釋液 2 以 1:99 的比例進行稀釋。
備注:取出濃縮緩沖液(10×)和稀釋液,觀察如有結晶屬正常現象,于 37 ℃溫育直至完-全溶解。
5. 標準品的配制:準備 8 個 1.5mL 離心管,按照標準品濃度依次標記。取 12 微升標準品和 588μL 稀釋液 1 分別加入第 1 個離心管,混勻即為ST1(100ng/mL),剩下7個離心管分別加入300μL稀釋液1,再按下圖進行梯度稀釋。
操作步驟
1.清洗酶標板:用 1× 洗液(300μL/ 孔)洗板三次,拍干。
2.孵育樣本:對應加入標準品和待測樣本,100μL/ 孔,37℃孵育 1h。
3.清洗酶標板:棄去孔中液體,加入 1× 洗液(300μL/ 孔),洗板五次,拍干。
4.檢測抗體孵育:將配制好的 1×檢測抗體加入到孔中,100μL/ 孔,37℃孵育 1h。
5.清洗酶標板:棄去孔中液體,加入 1× 洗液(300μL/ 孔),洗板五次,拍干。
6.酶結合物孵育:將配制好的 1×酶結合物加入到孔中,100μL/ 孔,37℃孵育 40min。
7.清洗酶標板:棄去孔中液體,加入 1× 洗液(300μL/ 孔),洗板五次,拍干。
8.顯色:使用前的10min 將顯色液恢復至室溫,每孔加入 100μL,37℃避光孵育 15min。
9.終止:每孔加入 50μL 終止液,輕輕搖動酶標板至顯色均勻。
10.上機:10min 內上酶標儀,讀取 450nm/630nm 波長處的吸光度值(450nm 為檢測波長,630nm 為參比波長)。
結果處理
1.標準曲線OD處理(見下例,僅為示例,具體以實際測定為準)
標準品濃度(ng/mL) | OD(1) | OD(2) | 平均值 |
100 | 2.7547 | 2.7934 | 2.7741 |
50 | 1.9245 | 1.924 | 1.9243 |
25 | 1.2892 | 1.2889 | 1.2891 |
12.5 | 0.8784 | 0.8985 | 0.8885 |
6.25 | 0.5444 | 0.5538 | 0.5491 |
3.125 | 0.3405 | 0.3385 | 0.3395 |
1.5625 | 0.2268 | 0.2322 | 0.2295 |
0.00 | 0.1229 | 0.1271 | 0.1250 |
0.00 | 0.1229 | 0.1271 | 0.1250 |
2. 以標準品理論濃度與對應OD值進行四參數擬合,得到標準曲線(如下圖所示)
注意事項
1. 試劑應按標簽說明儲存,使用前室溫(18-25℃)平衡。
2. 預包被板條使用前,請平衡至室溫(18-25℃)再打開外包裝袋,實驗中不用的板條應立即放回包裝中密閉封口, 4℃可保存一個月。其余不用試劑應包裝好或蓋好。
3. 標準品、生物-素及酶結合物體積量很小,使用前請短暫離心,以使管壁或管蓋的液體沉積到管底。
4. 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
5. 使用前檢查試劑盒內各種試劑。試劑稀釋、加樣和終止反應應充分混勻或搖勻對實驗結果尤為重要。
6. 洗滌過程中反應孔中殘留的洗液應在潔凈的紙巾上充分拍干,直至看不到水印。勿將紙巾直接放入反應孔中吸水。
7. 底物顯色液對光敏感,避免長時間暴露于光下,避免與金屬接觸影響結果。
8. 本產品為一次性使用的試劑盒,請在效期內使用。
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