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化工儀器網>產品展廳>試劑標物>常用實驗試劑>其它常用實驗試劑>EG24512S LightNing® BbsI內切酶

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EG24512S LightNing® BbsI內切酶

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公司簡介拼圖(1).jpg


蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司成立于2008年,位于蘇州園區生物納米園(BiobayA5301室。公司管理團隊專注于科學儀器行業十三年,擁有專業的技術團隊與完善的售后服務體系,目前已為300余家實驗室提供優質產品和服務,涵蓋各大高校、醫療機構、檢測中心、科研機構、制藥企業等13個群體。代理的實驗室儀器主要包括振蕩培養箱,PCR儀,移液器,生物反應器,發酵罐,移液器,超低溫冰箱,醫用冰箱,液氮罐,高壓滅菌器,超純水機,天平,離心機等。廠商企業授權包括知楚儀器、朗基、中科美菱,梅特勒,樂楓,搏旅、NEST、天根、奧盛在內等多家等。在提供產品的同時也為您提供生物實驗室常用的耗材試劑,以及實驗室整體搬遷、第三方檢測、計量與校準,二手儀器調劑等服務。完整的實驗室一站式體驗使您的選擇更加方便、快捷、靈活。

阿爾法性價比:一級代理;一手貨源;進口品質,國產價格;

阿爾法交貨期:自有倉庫,標準品有庫存,常規試劑耗材備有現貨;

阿爾法服務項目:實驗室現場規劃,提供選型建議,合理化配置;

阿爾法售后服務:時響應,2小時給出解決方案,12小時內響應服務。品牌物流廠商直供,門對門服務。

阿爾法增值服務:免費供樣機體驗,免費提供樣品試用,免費安裝指導,免費技術指導

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阿爾法生物,助力生命科學研究!讓你的實驗,順利進行沒有后顧之憂!


實驗室設備,儀器,生物反應器,發酵罐,不銹鋼生物反應器,實驗耗材,純水機,離心機,顯微鏡,電子天平

供貨周期 兩周 應用領域 生物產業,制藥/生物制藥

LightNing® BbsI內切酶組成

 

組分

規格

LightNing® BbsI

25 μl

10× CutOne® Buffer

1 ml

10× CutOne® Color Buffer

1 ml

 


特性和用法

LightNing® BbsI內切酶,可在5~15 min內完成反應


u建議反應條件

1× CutOne®緩沖液;

37℃溫育;

參照DNA 快速酶切流程”配制反應體系。

u失活條件

80℃溫育20 min

u甲基化敏感性

Dam 甲基化不敏感、對 Dcm 甲基化不敏感、對 CpG 甲基化不敏感。

u存儲條件

-20

 

相關問答

Q:為什么在CutOne® Buffer中加入HSA

A:一些酶在反應過程中需要HSA的參與,我們在CutOne® Buffer中添加了HSA,避免反應中額外添加組分,使得酶切反應更加便捷

 

Q:HSA的添加對于雷霆系列限制性內切酶的功能會產生什么樣的影響?

A:在我們的測試中未曾發現HSA對于雷霆系列限制性內切酶的功能有任何影響。在有些情況下,對于部分的酶切反應有促進作用。

 

Q:我需要嚴格遵守5~15 min的酶切時間嗎?能夠延長反應時間嗎?

A:雷霆系列限制性內切酶經過改造可以將酶切時間縮短至5~15 min。同樣也消除了限制性內切酶的星活性(長時間反應造成的非特異性消化),在說明書中告知的星活性出現的時間范圍內可以適當延長反應時間。

 

Q:我什么時候應當考慮星活性對于酶切反應的影響?

A:如果額外的酶切條帶對于實驗結果會產生影響時我們應當考慮星活性對于酶切反應的影響。例如:進行基因型、突變型分析或克隆時我們應當避免星活性的產生。避免星活性的有效方法:適當擴大反應體積(較小的反應體積容易造成甘油體積達到或超過總反應體積的5%);不進行超長時間孵育(過夜消化極易產生星活性)。

 

Q:有哪些關鍵因素會導致星活性?

A:長時間孵育、過量的酶、高甘油含量(通常高于5%)、較小的反應體系等因素都會導致星活性的產生。

 

 

Q:未經純化的PCR產物直接酶切要怎樣設定體系?

A:反應體系推薦由這些內容組成:10 μl PCR產物、2 μl 10×CutOneTM Buffer、1~2 μl相應的限制性內切酶、ddH2O補齊到30 μl。酶的用量根據PCR產物的濃度而定,只加入2 μl反應緩沖液的原因是PCR反應中存在對應的鹽離子和金屬離子,適當減少反應緩沖液的用量以保證最終反應體系中的環境適宜限制性內切酶發揮功能。

 

Q:限制性內切酶簡并性識別位點一定是回文的嗎?

A:大多數二型限制性內切酶的識別序列是回文的,而且是特定的堿基序列。然而有些限制性內切酶具有簡并性識別位點,也就是說識別位點中有一個或以上的堿基對是非特異的(例如:BsrfI識別5RCCGGY, R=A/G, Y=C/T)。對于這樣的具有簡并性識別位點的限制性內切酶,只要是符合要求的序列皆能被識別并且被正確地切割(例如5ACCGGC, 5ACCGGT, 5GCCGGC, 5GCCGGT,其中兩個并不是回文的,仍然能被BsrFI識別并且切割)。




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