CC96314 EHA105（pSoup）感受態(tài)
具體成交價以合同協(xié)議為準
- 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
- 品牌 語純生物
- 型號 CC96314
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/4/24 10:05:10
- 訪問次數(shù) 67
產(chǎn)品標簽
聯(lián)系方式：語純生物15316728970 查看聯(lián)系方式
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息，謝謝!
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | CC96314 | 應用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
EHA105（pSoup）感受態(tài)
產(chǎn)品簡介
EHA105 菌株由 EHA101 菌株改造而來，為 C58 型背景，核基因中含有篩選標簽——利福平抗性基
因 Rif，為了便于轉(zhuǎn)化操作，此菌株攜帶一無自身轉(zhuǎn)運功能的琥珀堿型 Ti 質(zhì)粒 pEHA105
(pTiBo542DT-DNA)，此質(zhì)粒含有 vir 基因 (vir 基因是 T-DNA 插入植物基因組必需的元件，
pEHA105 (pTiBo542DT-DNA)質(zhì)粒自身的 T-DNA 轉(zhuǎn)移功能被破壞，但可以幫助轉(zhuǎn)入的雙元載體 T
DNA 順利轉(zhuǎn)移)。在 EHA105 菌株中轉(zhuǎn)入 help 質(zhì)粒：pSoup 即為 EHA105 (pSoup)菌株，可幫助
pGreen，62SK，pGs2 系列質(zhì)粒在農(nóng)桿菌中復制，同時賦予該菌株四環(huán)素（Tet）抗性，適用于水稻、
煙草等植物的轉(zhuǎn)基因操作。本公司生產(chǎn)的 EHA105(pSoup)化學轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，
pGs2(卡那霉素抗性)質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率≥ 104 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
EHA105(pSoup)
化學感受態(tài)細胞
10 ×100 μL
100 ×100 μL
定制
基因型：C58 (RifR) Ti pEHA105 (pTiBo542DT-DNA) Succinamopine (pSoup-TetR)
存儲條件
-80 ℃保存; 請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
除琥珀堿型 Ti 質(zhì)粒 pEHA105 和 pSoup 質(zhì)粒外，無外源質(zhì)粒 DNA 殘留
化學法轉(zhuǎn)化效率≥104 cfu/μg DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，在手心融化成冰水混合物，置于冰水浴中；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，用手撥da管底混勻，依次于冰上靜置 10 分鐘、液氮 5 分
鐘（或干冰乙醇浴和-80℃冰凍）、37 ℃水浴 5 分鐘、冰浴 5 分鐘；
3.加入 900 μl 無抗生素的 YEB 液體培養(yǎng)基，于 28 ℃振蕩培養(yǎng) 2~3 小時；
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌，留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的 YEB 平板
上，倒置放于 28 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2-3 天（當平板只含有 50 μg/ml Kan 時，28 ℃培養(yǎng) 48 h 即可；平板中同
時加入 50 μg/ml Kan，20 μg/ml Rif 時，需 28 ℃培養(yǎng) 60 h；如果使用的平板含有 50 μg/ml Rif 則需要 28℃
培養(yǎng) 72-90 h）。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；
3. 利福平濃度不應高于 25 μg/μl，過高的利福平濃度不利于農(nóng)桿菌生長，會降低其生長速度和轉(zhuǎn)化效率；
4.因為 Ti 質(zhì)粒丟失的概率極低（可以忽略）， 一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時不考慮添加相應抗生素。
EHA105（pSoup）感受態(tài)
采購中心
化工儀器網(wǎng)