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概況

高通量單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)對(duì)樣本的要求很高，需要將樣本制備成高質(zhì)量的單細(xì)胞懸液才能進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。但實(shí)體組織多種多樣，根據(jù)不同實(shí)體組織成分的特點(diǎn)可以選擇不同的分散細(xì)胞的方法。常用的制備單細(xì)胞混懸液有酶解法，機(jī)械法和化學(xué)處理法。在處理不同組織時(shí)，需要摸索合適方法，盡可能采用對(duì)細(xì)胞損傷小，產(chǎn)率較高的制備方法，最大限度地保持細(xì)胞原有特性。

酶解法利用特定酶進(jìn)行相應(yīng)的化學(xué)反應(yīng)除掉一些特定結(jié)構(gòu)，尤其適合將小塊組織消化成為單個(gè)細(xì)胞，常規(guī)消化需要在一定的時(shí)間和溫度下進(jìn)行振蕩操作，樣品量一般在 1 ~ 2 ml 左右。

測(cè)試條件

樣品 水

儀器 MATRIX Orbital Delta F2.0 恒溫混勻儀

混勻 關(guān)閉

溫度 37 °C

樣品量 1.8 ml * 24

實(shí)驗(yàn)步驟

1. 使用水作為測(cè)試樣品，來(lái)驗(yàn)證儀器的控溫效果。

2. 在 MATRIX Orbital Delta F2.0 恒溫混勻儀中加入 1.8 ml 水，設(shè)定 37 ℃，選擇 Fast 控溫模式。

3. 使用第三方溫度探頭測(cè)試水的溫度穩(wěn)定性和均一性。

結(jié)果

> 溫度均一性為 6 個(gè)點(diǎn)的最大溫度偏差

> 溫度準(zhǔn)確性為 6 個(gè)點(diǎn)與設(shè)定值的最大偏差

> 該測(cè)試未開(kāi)啟混勻功能

結(jié)論

1. 不同的酶消化反應(yīng)，對(duì)溫度以及消化時(shí)間要求不同, 合適的消化酶以及設(shè)備能大大加快細(xì)胞解離速率，也有利于獲得更高的細(xì)胞產(chǎn)量。酶解法在細(xì)胞分離中適用范圍廣，是分離方法的推薦選折。

2. IKA 恒溫混勻儀 MATRIX Orbital Delta 系列可用于酶解法中的消化反應(yīng)。高通量、精確控溫、定時(shí)，可調(diào)混勻速度保證高質(zhì)量單細(xì)胞混懸液的制備。

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關(guān)于IKA

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