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血管緊張素轉化酶抑制劑活性檢測試劑盒說明書

紫外分光光度法

貨號：BC5570

規格：50T/48S

產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑三：臨用前取一支加入50μL蒸餾水溶解（約22T），可-20℃分裝保存4周，避免反復凍融。

2. 試劑三工作液：根據樣本量按照試劑三：試劑一 = 9µL：1791µL（共1.8mL，4T）的比例配制，現用現配。

3. 試劑四：5mg卡托*，臨用前加入4.6mL蒸餾水，充分溶解，配制成5mmol/L卡托*。用不完的試劑-20℃分裝保存4周，避免反復凍融。

產品說明：

血管緊張素轉化酶（Angiotensin Converting Enzyme，ACE，EC 3.4.15.1，也稱為ACE1）是一種含鋅二肽羧基肽酶，相對分子質量為120-150kDa，主要存在于肺、腦、腎等各種組織內皮細胞。ACE主要功能是使緩激肽失活和催化血管緊張素Ⅰ轉化為血管緊張素Ⅱ，后者可引發血管強烈收縮，促進腎上腺皮質激素醛固酮的合成和釋放。血管緊張素轉化酶抑制劑可減少血管緊張素Ⅱ生成，增加緩激肽活性，從而成為治療高血壓、心肌肥厚、心力衰竭等疾病的理想選擇。

ACE可催化底物N-[3-（2-呋喃基）丙烯?；?span style="font-family: 'times new roman'">]- L -苯丙氨酰-甘氨酰-甘*酸（FAPGG）水解生成呋喃丙烯?；?span style="font-family: 'times new roman'">- L -*氨酸（FAP）和雙甘氨肽（GG），ACE抑制劑可通過抑制ACE活性減少FAPGG的水解。FAPGG在340nm處有特征吸收峰，根據其在340nm的變化，可計算得到ACE抑制劑活性大小。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計、低溫離心機、分析天平、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、水浴鍋/恒溫培養箱、1mL石英比色皿、可調式移液槍、冰和蒸餾水。

操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件

參考文獻：

[1] Sun S, Xu X, Sun X, et al. Preparation and Identification of ACE Inhibitory Peptides from the Marine Macroalga Ulva intestinalis[J]. Marine Drugs, 2019, 17(3).

[2] Murray B A, Walsh D J, Fitzgerald R J. Modification of the furanacryloyl-L-phenylalanylglycylglycine assay for determination of angiotensin-I-converting enzyme inhibitory activity[J]. Journal of Biochemical & Biophysical Methods, 2004, 59(2): 127-137.

[3] Gajanan P G, Elavarasan K, Shamasundar B A. Bioactive and functional properties of protein hydrolysates from fish frame processing waste using plant proteases[J]. Environmental Science & Pollution Research, 2016, 23(24): 24901-24911.

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