目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> D7800 100ml DNS試劑DNS試劑
| CAS | 123 | 純度 | 123 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 123 | 分子式 | 123 |
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100ml；500ml |
| 貨號 | D7800 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,石油 |
| 主要用途 | 比對標準葡萄糖曲線 |
DNS試劑 生化試劑盒
貨號：D7800
規格：100mL/500mL
保存：4°C避光保存，12個月有效。
產品說明：
植物體內的碳素營養狀況以及農產品的品質性狀，長以糖含量作為重要指標。單糖和某些寡糖（如麥芽糖）含有游離的醛基或酮基，具有還原性，屬于還原糖；多糖和蔗糖等屬于非還原糖?？梢岳枚嗵悄鼙凰崴鉃閱翁堑奶匦酝ㄟ^測定水解后的單糖含量對總糖進行測定。
DNS試劑是植物總糖和還原糖檢測（硝基水楊酸法）的成分之一，其檢測原理是還原糖在堿性條件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物。在一定范圍內，還原糖的量與棕紅色產物的顏色深淺程度呈一定比例關系。在540nm處測定棕紅色物質的吸光度，該吸光度值與還原糖含量呈線性關系，利用比色法和標準曲線測得樣品中的還原糖和總糖的含量。本試劑僅用于科研領域，不宜用于臨床診斷或其他用途。
自備材料：
1、蒸餾水
2、50mL離心管
3、離心機
4、水浴鍋或恒溫箱
5、分光光度計
6、鹽酸溶液、氫氧化鈉溶液
操作步驟：（僅供參考）
1、還原糖的提?。?/span>
（1）稱取植物樣品0.5-3g，剪碎，加入蒸餾水約3mL勻漿，轉移至燒杯或三角瓶中，用12mL蒸餾水沖洗研磨器2-3次，洗出液也轉移至該容器。
（2）50°C水浴30min，并不時攪拌，以便還原糖*浸出。
（3）將沉淀和浸出液轉移至50mL離心管，4000g離心5min。
（4）留取上清液，向沉淀中加入20mL蒸餾水，混勻，再次4000g離心5min。
（5）留取上清液，將二次獲得的上清液合并，用蒸餾水定容至100mL（提取液），混勻，作為還原糖待測液。
2、總糖的水解和提?。?/span>
（1）稱取植物樣品0.5-3g，剪碎，加入蒸餾水約3mL勻漿，轉移至燒杯或三角瓶中，用12mL蒸餾水沖洗研磨器2-3次，洗出液也轉移至該容器。
（2）向容器中加入10mL 6M 鹽酸溶液，攪拌均勻，煮沸30min，并不時攪拌。
（3）取兩滴滴加于載玻片上，滴加一滴顯色液，檢查水解是否*，如已經水解*，則不顯示藍色。
（4）水解完畢后，冷卻至室溫，加入6M氫氧化鈉溶液，使溶液pH至7.4，用蒸餾水定容至100mL，混勻，4000g離心5min或過濾。
（5）取上清或濾液10mL，用蒸餾水定容至100mL，成稀釋1000倍的總糖水解液（提取液），取1mL總糖水解液，測定其還原糖的含量。
3、制作葡萄糖標準曲線：取干凈離心管或試管，按下表進行操作，以0號調零，檢測540nm處吸光度，以吸光度值為縱坐標，各標準濃度（mg/mL）為橫坐標作圖得標準曲線。
加入物質（mL） | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
Glu標準（1mg/mL） | 0 | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1.0 |
蒸餾水 | 1.0 | 0.8 | 0.6 | 0.4 | 0.2 | 0 |
DNS試劑 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
沸水浴中準確煮沸5min，取出，自來水冷卻至室溫。 | ||||||
蒸餾水 | 9.0 | 9.0 | 9.0 | 9.0 | 9.0 | 9.0 |
相當于葡萄糖量 | 0 | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1.0 |
4、還原糖測定：取制備好的還原糖提取液或者總糖水解液1mL，分別加入DNS試劑2mL，其余操作同標準曲線的操作，540nm處測定各管的吸光度。
計算：
還原糖的百分含量（%）=（C×VT）/（m×VS）×100
總糖的百分含量：
總糖含量（%）=（C×VT）/（m×VS）×100×10×0.9
式中：C=從標準曲線查的糖量（mg）
VT=提取液的體積（mL）
m=植物樣品的質量（mg）
VS=測定時用的樣品體積（mL）
注意事項：
1、上述低溫試劑避免反復凍融，以免失效或效率下降。
2、待測樣本如不能及時測定，應置于2-8°C保存，3天內穩定。
3、如果樣品還原糖濃度過高，應用蒸餾水稀釋后重測，結果乘以稀釋倍數。
4、總糖 計算公式在測定干擾雜質很少、還原糖含量相對總糖含量很少時使用，×0.9是為了從測定出的總糖水解成單糖中，扣除水解時所消耗的水量。
相關文獻:
[1] Yuxing Wu,Liangsheng Xu,Zhiyuan Yin,et al. Transcription factor VmSeb1 is required for the growth, development, and virulence in Valsa mali. Microbial Pathogenesis. October 2018;132-138. (IF 2.332)
16
化工儀器網