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技術文章
淋巴細胞分離液
點擊次數：5561 發布時間：2012-1-14
淋巴細胞分離液
| 產品編號 | 包裝 | 價格 |
| 130010-L | 60ml | 86.00 |
| 130010-L1 | 120ml | 125.00 |
| 130010-L2 | 200ml | 190.00 |
淋巴細胞分離液是一種根據細胞密度差異，借助離心產生的重力加速度，進行細胞的分離純化的常用試劑。從外周血、骨髓、外周淋巴器官或各種組織分離出來的細胞是多種細胞的混合物，如要研究某種特定細胞的結構、功能或表面標志等特征，首先要分離純化細胞。根據細胞的大小、密度、表面荷電、吸附能力或表面抗原的差異可實現對目的細胞的分離、純化，常用的細胞分離與純化方法有密度梯度沉降法、細胞電泳、貼附、親和層析、花環形成、補體介導殺傷溶解以及流式細胞儀（FCM）和免疫磁珠分選等。密度梯度沉降法是根據細胞密度差異，借助細胞分離液和離心，進行細胞分離純化的常用方法之一。細胞分離液則是一類能產生一定程度的密度梯度，高密度時粘度不高，濃度不同時滲透壓變化不大，經洗滌去除后能用于體外培養，而對細胞沒有毒性。zui常用的細胞分離液有Ficoll和Percoll。Ficoll是蔗糖的多聚體，呈中性，吸水性強，平均分子量為400,000，當密度為1.2g/ml仍未超出正常生理性滲透壓,也不穿過生物膜。紅細胞、粒細胞比重大，離心后沉于管底；淋巴細胞和單核細胞的比重小于或等于分層液比重，離心后漂浮于分層液的液面上，也可有少部分細胞懸浮在分層液中。吸取分層液液面的細胞，就可從外周血中分離到單個核細胞。
賽馳生物生產的淋巴細胞分離液（Lymphocytes Separation Medium）以Ficoll和泛影酸鈉為主原材料，配制成密度為1.077的，無菌溶液。該產品適用于人淋巴細胞和大多數哺乳動物細胞的分離純化，能除去紅細胞和死細胞碎片。
包裝清單
2-8℃避光保存。
使用說明
1.在離心管中加入適量。
2.取抗凝血（無溶血）與等量Hank’s液或平衡鹽溶液充分混勻，用滴管沿管壁緩慢疊加于分層液面上，注意保持兩液面界面清晰，水平離心2000rpm×20分鐘。
3.離心后，管內液體分為三層，上層為血漿和Hank’s液，下層主要為紅細胞和粒細胞。中層為，在中上層液面處有一白色云霧層狹窄帶，即為富含淋巴細胞和單核細胞的單個核細胞（PBMC）及血小板。
4.吸去zui上層的血漿，收集血漿層和交界面的單個核細胞，盡量全部吸出PBMC，移入一新的離心管中；
2.取抗凝血（無溶血）與等量Hank’s液或平衡鹽溶液充分混勻，用滴管沿管壁緩慢疊加于分層液面上，注意保持兩液面界面清晰，水平離心2000rpm×20分鐘。
3.離心后，管內液體分為三層，上層為血漿和Hank’s液，下層主要為紅細胞和粒細胞。中層為，在中上層液面處有一白色云霧層狹窄帶，即為富含淋巴細胞和單核細胞的單個核細胞（PBMC）及血小板。
4.吸去zui上層的血漿，收集血漿層和交界面的單個核細胞，盡量全部吸出PBMC，移入一新的離心管中；
5.加入Hanks’液或無血清培養液，混勻后離心200×g 10分鐘，棄去上清液（低速離心有利于去除細胞懸液中留存的血小板）。
6.再用同樣洗滌液洗滌細胞2次，每次離心500×g 10分鐘，以洗去殘留的。再用細胞培養液將細胞調配成適當濃度。通常，每毫升外周血可得1～2×106PBMC
| 產品編號 | 130010-L | 130010-L1 | 130010-L2 |
| 60ml | 120ml | 200ml | |
| 說明書 | 1 份 | ||
保存條件