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上海起發實驗試劑有限公司

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技術文章

AssayQuant:用創新技術推動藥物研發

點擊次數:117 發布時間:2025-4-16

AssayQuant:用創新技術推動藥物研發

Dyomics是一家專注于熒光染料及相關產品研發、生產和銷售的高科技生物技術公司。憑借20余年的技術積累,Dyomics已成為全球生命科學、醫學診斷和材料科學領域的品牌。公司以“創新驅動科學"為核心理念,致力于開發高性能熒光探針,產品覆蓋藍色至深紅色全光譜范圍,具有高靈敏度、光穩定性和多功能性,廣泛應用于顯微鏡檢測、流式細胞術、體內成像等場景。

Dyomics不僅提供標準化產品,還針對客戶需求提供定制合成服務,例如親脂性膜探針、增強斯托克斯位移染料等,滿足前沿研究的特殊需求。其技術團隊由經驗豐富的化學家與生物學家組成,持續推動熒光標記技術的突破,合作案例涵蓋制藥企業藥物研發、高校基礎研究及臨床診斷機構的高通量檢測。


核心優勢

1.PhosphoSens技術

SOX熒光團:尺寸小(與色氨酸相當)、疏水性低,可直接標記底物多肽,實現連續熒光信號輸出,避免化合物自身熒光干擾。

動態監測:每30秒至2分鐘采集數據,實時捕捉酶活性變化,支持動力學參數(如IC50、Ki、kon/koff)計算。

2.高特異性與生理相關性

底物基于天然激酶底物序列優化,確保實驗結果與體內環境高度一致,生化實驗與體內研究相關性優異。

3.多功能檢測模式

連續熒光檢測:兼容常規熒光酶標儀,無需額外設備。

時間分辨熒光(TRF):使用Eu3?替代Mg2?,通過紅移信號(620nm)消除背景干擾,適用于高靈敏度終點檢測。

4.靈活應用場景

支持抑制劑效能評估、激酶組分析、高通量篩選(HTS)、脫靶效應研究等,覆蓋腫瘤、免疫、代謝疾病等領域。


主要產品、技術介紹:

1.ALK [C1156Y](PhosphoSens Substrate: AQT0101)

AssayQuant:用創新技術推動藥物研發

AssayQuant 的 PhosphoSens 連續檢測技術 采用簡單的 “添加-讀取"操作流程,支持實時動力學監測,僅需通過熒光強度(FI)測量即可完成。

該技術通過測量反應初始階段(通常為前30-60分鐘)的初始線性區域斜率,提供高精度和高準確性的 初始反應速率 數據,并以每30秒至2分鐘的頻率采集大量數據點。

連續檢測格式 還可通過以下方式校正化合物自熒光干擾:

背景信號(包含化合物及反應體系中除酶外的所有組分)的熒光信號在反應過程中恒定不變;

通過從總熒光信號(包含酶及所有反應組分)中減去背景信號,即可計算每個時間點的 凈信號。

該技術兼容幾乎所有具備 動力學讀板功能 的商用熒光酶標儀及實驗室自動化設備,無需終止反應或顯色步驟,顯著縮短實驗時間并提升通量。


2.ABL1(PhosphoSens Substrate: AQT0030)

AssayQuant:用創新技術推動藥物研發

由于許多化合物庫含有自熒光化合物,AssayQuant 推出了 PhosphoSens Red 檢測試劑盒,該試劑盒允許在更長波長(>600 nm)下進行檢測,同時保持相同的激發波長最大值,并采用 時間分辨熒光(TRF) 技術。

我們建議在激發光與發射波長檢測之間設置 100 微秒延遲,并采用 300 微秒采集時間,以避免反應混合物中熒光材料(具有納秒級短壽命)的信號干擾。

反應完成后,向每個孔中加入基于 銪離子(Eu3+) 的試劑,該試劑會置換螯合復合物中的 Mg2+。Soc 熒光團被激發后,通過敏化作用增強銪的發光,產生最大波長為 615 nm(紅色) 的光信號,可通過標準濾光片進行測量。


3.CDC42BPG(PhosphoSens Substrate: AQT0837)


AssayQuant:用創新技術推動藥物研發

由于許多化合物庫含有自熒光化合物,AssayQuant開發了PhosphoSens Red檢測技術,該技術允許在更長波長(>600 nm)下進行檢測,同時保持相同的激發波長最大值,并采用時間分辨熒光(TRF)技術。

我們建議在激發光與發射波長檢測之間設置100微秒延遲,并采用300微秒采集時間,以避免反應混合物中熒光材料(具有納秒級短壽命)的信號污染。

反應完成后,向每個孔中加入基于銪離子(Eu3?)的試劑,該試劑會置換螯合復合物中的鎂離子(Mg2?)。Sox熒光團的激發會敏化銪離子的發光,產生最大波長為615 nm(紅色)的光信號,可通過標準濾光片進行測量。


目標客戶群體

生物醫藥企業:小分子激酶抑制劑研發、臨床前藥效評價。

科研機構:癌癥、免疫疾病等領域的酶學機制研究。

CRO/CDMO:高通量篩選、化合物庫活性評估。

診斷試劑開發:基于激酶活性的檢測方法學建立。


常見問題與解答

Q1:PhosphoSens技術與傳統終點法相比有何優勢?

A:傳統終點法僅能獲取單一時間點數據,而PhosphoSens通過連續監測反應曲線,可精準計算動力學參數(如IC50、Ki),并區分可逆/不可逆抑制劑。

Q2:SOX熒光團是否兼容常規熒光酶標儀?

A:是的。SOX在485nm激發/485nm發射模式下,與主流酶標儀(如FlexStation 3、SpectraMax)兼容。

Q3:如何解決化合物自身熒光干擾問題?

A:使用PhosphoSens-Red試劑盒(含Eu3?),通過時間分辨熒光(延遲100秒讀取620nm信號)有效規避干擾。

Q4:是否支持高通量篩選(HTS)?

A:支持。PhosphoSens試劑盒設計適配96孔板,可集成至自動化液體處理系統,單板通量達384孔。

Q5:能否定制特殊突變體底物?

A:可以。AssayQuant提供定制化多肽合成服務,覆蓋野生型及常見突變體(如EGFR T790M、ALK C1156Y)。

Q6:樣品處理對檢測結果影響大嗎?

A:建議使用低濃度ATP(1-2 mM)模擬生理條件,并避免反復凍融。具體方案可參考產品說明書或聯系技術支持。

Q7:試劑盒的有效期和儲存條件?

A:多數試劑盒有效期為12個月,需避光儲存于-20℃。凍干粉需復溶后48小時內使用。

Q8:如何驗證抑制劑的可逆性?

A:采用“跳躍稀釋法":在高濃度抑制劑(>IC50 25倍)中孵育酶后稀釋,可逆抑制劑活性恢復,不可逆抑制劑活性維持低位。

Q9:是否提供技術培訓與文獻支持?

A:是的。AssayQuant提供線上/線下操作培訓,并可分享同類靶點的成功案例及文獻數據。

Q10:支持哪些物種的激酶檢測?

A:目前主要覆蓋人類激酶組,部分試劑盒兼容小鼠、大鼠等模式生物,定制服務可擴展至其他物種。


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Cysteine Sox Kinase Sensor AqT0101

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50mM(50*)Europium

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BULK - Cysteine Sox Kinase Sensor AQT0101, Peptide Substrate, 1mg net peptide, lyophilized (Lot 011-02V1)

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