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“上海恒遠(yuǎn)”文獻(xiàn)：IMD對缺血ATP敏感性鉀通道的作用研究
閱讀：457 發(fā)布時間：2019-7-4“上海恒遠(yuǎn)”文獻(xiàn)：IMD對缺血-再灌注心肌保護(hù)ATP敏感性鉀通道的作用研究
衛(wèi)雷 成尚霖 馬捷
【摘要】目的 觀察心肌缺血期處理后在體大鼠心肌缺血- 再灌注損傷中中介素(Intermedin IMD) 參與情況下的保護(hù)機(jī)制 ； 研究IMD對心肌細(xì)胞的保護(hù)作用是否途經(jīng)ATP敏感性鉀通道(ATP-sensitive potassium channel，KATP)，為探討心肌保護(hù)機(jī)制提供臨床思路。方法 選取標(biāo)準(zhǔn)SD 大鼠45 只，隨機(jī)分為缺血再灌注組(I/R 組)、IMD 治療組(IMD 組)、格列本脲+IMD 治療組(Gli+IMD 組)，每組15 只。各組分別于再灌注末期分別抽取動脈血3ml，用比色法測定血清CK 和LDH，用ELISA 法測cTnI活性。取心尖部心肌組織，10% 甲醛液固定，石蠟包埋，后在光鏡下觀察心肌損害程度。結(jié)果 IMD 組與I/R 組比較，P <0.01 ；
Gli+IMD 組與I/R 組、IMD組比較，P <0.05。結(jié)論 IMD在心血管系統(tǒng)中具有保護(hù)作用且其機(jī)制可能與其激活了ATP敏感性鉀通道相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】ATP 敏感性鉀通道；缺血再灌注；IMD；心肌保護(hù)
doi:10.3969/j.issn.1673-5552.2011.22.0010
【中圖分類號】R364.1 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1673-5552(2011)22-0021-02
缺血性心臟病(IHD) 已成為西方國家人口死亡的重要原因， 在我國已經(jīng)上升至人口死亡原因的第二位[1]。關(guān)于IHD 的治療首先是恢復(fù)血液灌注，其目的在于解除組織的缺氧和營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足的狀態(tài)，以阻止缺血性損傷的發(fā)展或促使其恢復(fù)[2]。在對缺血再灌注(Ischemia-reperfusion injury I/R) 損傷的機(jī)制研究中，中介素(Intermedin IMD) 也稱腎上腺髓質(zhì)素2(ADM-2)，是2003 年至今新近確認(rèn)的降鈣素基因相關(guān)肽超家族成員，廣泛表達(dá)于嚙齒類動物大腦、垂體、腎臟、心臟、肺臟、胃腸道、卵巢，血管內(nèi)皮細(xì)胞[3]。IMD 同家族成員如ADM和CGRP具有多種生物學(xué)效應(yīng)，對多個器官系統(tǒng)有調(diào)節(jié)作用，已被諸多文獻(xiàn)證實具有很強(qiáng)的心血管保護(hù)作用。IMD 是一種新的內(nèi)源性抗損傷保護(hù)物質(zhì)，可能作為心血管疾病防治的新靶點[4,5]。因此，IMD 在心肌缺血再灌注損傷中的保護(hù)作用及其機(jī)制值得進(jìn)一步研究。
1材料與方法
1.1實驗動物
選用雄性SD大鼠45 只，體重240-300g( 由山西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供)，在常規(guī)條件下飼養(yǎng)，普通飲食，自由飲水。
1.2藥品、試劑和儀器
IMD( 美國Phoenix 公司)、格列本脲( 上海研域化學(xué)試劑有限公司)，cTnI 試劑盒(Biosource 公司)，乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK) 試劑盒( 上海恒遠(yuǎn)生化試劑有限公司) ；微型動物呼吸機(jī)( 浙江醫(yī)科大學(xué)醫(yī)療儀器實驗廠) ；心電圖機(jī)( 上海奧爾科特生物科技有限公司)。
1.3I/R 模型的制備
大鼠稱重后以20% 烏拉坦溶液(4ml/kg) 腹腔注射麻醉，仰臥固定，將心電圖針狀電極插入大鼠四肢皮下，描記肢體Ⅱ?qū)?lián)心電圖。常規(guī)左側(cè)胸前區(qū)備皮，頸正中切開皮膚，鈍性分離頸前肌，氣管切開置管，連接微型動物呼吸機(jī)控制呼吸 ；分離出右頸總動脈，用于插管采集血液樣本。沿胸骨左緣第4、5 肋間順勢剪開心包，充分暴露心臟及左心室表面血管，以左冠狀動脈前降支(LAD) 為標(biāo)志，在左心耳根部下方0.3-0.4cm 處進(jìn)針，6/0 絲線( 結(jié)扎線) 穿過心肌組織在肺動脈圓錐旁出針，結(jié)扎線兩端分別套入絲線環(huán)作為再灌注拉線，收緊結(jié)扎線使左冠脈前降支閉塞30min，以造成心肌缺血。成功標(biāo)志為 ：心電圖ST 段弓背向上抬高和結(jié)扎線以下血管支配區(qū)表面顏色由正常變蒼白再變青紫示為心肌缺血。牽拉再灌注拉線使結(jié)扎線放松后恢復(fù)血流即行再灌注2h，造成I/R 模型。
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