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GB/T 29405-2012 糧油檢驗 谷物及制品脂肪酸值測定 儀器法

范圍
本標準規定了光度滴定儀法和智能電位滴定儀法測定谷物及制品脂肪酸值的術語和定義、原理、試劑與材料、儀器和設備、操作步驟、結果計算與表示。
本標準光度滴定儀法適用于稻谷、糙米、大米脂肪酸值的測定，智能電位滴定儀法適用于玉米、稻谷、糙米、大米、小麥粉脂肪酸值的測定。

術語和定義
脂肪酸值  fat acidity
試樣中游離脂肪酸的含量。以中和100g試樣干物質中游離脂肪酸所需氫氧化鉀的毫克數表示，即以干基KOH計單位為mg/100g。

光度滴定法
原理
在一定溫度條件下，用無水乙醇提取試樣中的游離脂肪酸，以百里香酚藍指示液做指示劑，用氫氧化鉀標準溶液滴定。采用光學傳感器檢測透過滴定體系溶液的光能量變化，自動判定滴定終點，人工讀數或自動記錄提取液消耗氫氧化鉀標準溶液的體積。同時，通過微處理器系統，利用內置模式識別系統來控制滴定過程和處理滴定結果。

儀器和設備
光度滴定儀: 配75mL測量杯和加液裝置。加液裝置體積精度0.01mL。光度滴定儀分為全自動光度滴定儀和半自動光度滴定儀。
天平: 感量0.01g。
振蕩器: 往返式，振蕩頻率為100次/min。
實驗礱谷機。
粉碎機: 帶0.8mm圓孔篩片的錘式磨，粉碎時應保持樣品不發熱。
具塞磨口錐形瓶: 250mL。
玻璃短頸漏斗。
移液管: 50mL、25mL、10mL。
具塞試管(大于25mL)或具塞錐形瓶(50mL)。

滴定
光度滴定儀的滴定管加滿氫氧化鉀標準滴定溶液，并自動校正零點。用25mL移液管準確移取25.0mL濾液至測量杯中，再用另一支移液管準確移取25.0mL百里香酚藍指示液至測量杯中，加入攪拌子。將測量杯放入儀器測量池中并蓋上蓋，啟動"滴定"按鈕，當"終點"指示燈亮時即為滴定終點，光度滴定儀自動停止滴定。
采用半自動光度滴定儀滴定，人工記下所耗用的氫氧化鉀標準滴定溶液體積(V₁)。采用全自動光度滴定儀滴定，儀器自動記存所耗用的氫氧化鉀標準滴定溶液體積(V₁)。

空白試驗
用25.0mL無水乙醇代替濾液，其余操作同上 。采用半自動光度滴定儀滴定，人工記下所耗用的氫氧化鉀標準滴定溶液體積(V₀)。采用全自動光度滴定儀滴定，儀器自動記存所耗用的氫氧化鉀標準滴定溶液體積(V₀)。

結果計算
采用半自動光度滴定儀滴定，試樣脂肪酸值(A_K)按式(1)計算:

式中:
A_K一一試樣脂肪酸值(以KOH計)，單位為毫克每百克(mg/100g)；
11220一一換算成氫氧化鉀毫克數的常數，即56.1×2×100；
V₁一一滴定25mL試樣提取液所耗氫氧化鉀標準滴定溶液體積，單位為毫升(mL)；
V₀一一滴定空白液所耗氫氧化鉀標準滴定溶液體積，單位為毫升(mL)；
c  一一氫氧化鉀標準滴定溶液的濃度，單位為摩爾每升(mol/L)；
m 一一試祥質量，單位為克(g)；
ω 一一試樣水分質量分數，即100g試樣中含水的質量，單位為克(g)。
采用全自動光度滴定儀滴定，輸入試樣含水量和試樣質量后，儀器自動計算出試樣脂肪酸值(以KOH計)，以毫克每百克表示(mg/100g)。

智能電位滴定儀法
原理
在一定溫度條件下，用無水乙醇提取稻谷、糙米、大米、玉米中的游離脂肪酸，以苯提取小麥粉中的游離脂肪酸，用氫氧化鉀標準溶液滴定，以電極作為指示終點的傳感器，在滴定終點附近，被測離子的濃度發生突變，引起電極電位的突躍，采用模糊邏輯控制算法(灰度模型)與反向傳播算法(BP神經網絡)控制滴定過程，采集電極的動態信號，根據擬和曲線確定滴定終點，儀器自動計量并計算試樣脂肪酸值。

儀器和設備
除上面規定的外，還包括以下儀器設備:
智能電位滴定儀或電位滴定儀: 配150mL測量杯(杯口可加橡膠密封圈)和饋液裝置，小饋液量0.0005mL，體積精度0.01mL。
pH復合電極: 電極斜率應保證在90%～105%。
磁力攪拌臺: 攪拌速度可連續調節。

滴定
儀器準備
按儀器操作說明書進行。
滴定
玉米粉、糙米粉、大米粉試樣: 用25mL移液管移取25.0mL濾液至測量杯中，加入50mL無二氧化碳蒸餾水，放入攪拌子，將測量杯放在磁力攪拌臺上，將滴定支架落下，電極與進液管浸入液面下。
小麥粉試樣: 用25mL移液管移取25.0mL濾液至測量杯(帶有橡膠密封圈)中，再用另一支25mL移液管移取25.0mL 95%乙醇至測量杯(帶有橡膠密封圈)中，加入攪拌子。將測量杯(帶有橡膠密封圈)放在磁力攪拌臺上，將帶有密閉上蓋的滴定支架落下，電極與進液管浸入液面下。
根據被測試樣選擇"玉米"、"稻谷"(稻谷、糙米、大米樣品均選擇"稻谷")、"小麥"按鍵后，按"啟動"鍵開始測定，儀器自動判斷終點并停止滴定。儀器自動記存所耗用的氫氧化鉀標準滴定溶液體積(V₁)。

空白試驗
測定玉米粉、大米粉試樣時用25.0mL無水乙醇、測定小麥粉試樣時用苯代替濾液，其余操作同上。儀器自動記存所耗用的氫氧化鉀標準滴定溶液體積(V₀)。

結果計算
輸入試樣含水量和試樣質量，儀器自動計算出試樣脂肪酸值(以KOH計)，以毫克每百克表示(mg/100g)。


京都電子KEM 光度滴定儀和智能電位滴定儀一體機AT-710S
AT-710S可同時記錄光學傳感器光能量變化和pH復合電極電位變化，并處理滴定結果。
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