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ELISA（雙抗體夾心法）—檢測(cè)HBsAg
【摘要】：以已知抗體(抗HBs)包被載體，然后將含有抗原的待檢標(biāo)本加入，共同孵育后，抗原結(jié)合于包被抗體上，再加入酶標(biāo)記特異抗體(酶標(biāo)抗HBs)，酶標(biāo)抗體連接到抗原上，zui后加入底物溶液，根據(jù)顏色反應(yīng)來(lái)判定抗原含量。 【材料】HBsAg試劑盒，本試劑盒含: 1、包被抗-HBs反應(yīng)條 1瓶 2、酶結(jié)合物 1瓶 3、HBsAg陽(yáng)性對(duì)照 1瓶 4、HBsAg陰性對(duì)照 1瓶 5、洗滌液:用前每瓶作1：20稀釋 1瓶 6、顯色劑（
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【材料】HBsAg試劑盒，本試劑盒含:

1、包被抗-HBs反應(yīng)條

1瓶

2、酶結(jié)合物

1瓶

3、HBSAg陽(yáng)性對(duì)照

1瓶

4、HBsAg陰性對(duì)照

1瓶

5、洗滌液:用前每瓶作1：20稀釋

1瓶

6、顯色劑(TMB)A

1瓶

7、顯色劑(TMB)B

1瓶

8、終止液

1瓶

【方法】

1、加入待測(cè)標(biāo)本每孔0.05ml，并設(shè)HBsAg陽(yáng)性對(duì)照2孔，HBsAg陰性對(duì)照2孔，空白對(duì)照1孔，然后加入酶結(jié)合物每孔1滴(0.05ml、空白對(duì)照孔不加)，充分混勻后置37℃孵育30分鐘。

2、洗板:棄去反應(yīng)條孔內(nèi)液體、拍干、用洗滌液注滿每孔，棄去拍干，反復(fù)五次后拍干。

3、顯色劑:先加顯色劑A每孔1滴(0.05ml)，然后再加顯色劑B每孔1滴(0.05ml)，混勻，37℃孵育10分鐘。

4、每孔加終止液1滴(0.05ml)，混勻。

【結(jié)果】

比色法:波長(zhǎng)450nm，先用空白孔校零點(diǎn)，然后讀取各孔光密度值。

樣品OD值/陰性對(duì)照平均OD值≥ 2.1判斷為陽(yáng)性，否則為陰性。

備注：陰性對(duì)照平均OD值低于0.05作0.05計(jì)算，高于0.05按實(shí)際OD值計(jì)算。陽(yáng)性對(duì)照OD值≥0.8，實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效。

【注意事項(xiàng)】

1、試劑盒置2℃～8℃保存。

2、使用前試劑應(yīng)搖勻，并棄去1～2滴后垂直滴加。

3、從冷藏環(huán)境中取出試劑盒內(nèi)全部瓶裝試劑及待測(cè)標(biāo)本所需微孔條，置室溫平衡30分鐘后再行測(cè)試，余者應(yīng)及時(shí)封存于冰箱中以備后用。

4、待測(cè)標(biāo)本不可用NaN3防腐。

5、不同批號(hào)試劑請(qǐng)勿通用。

6、結(jié)果判斷須在10分鐘內(nèi)完成。

7、若濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶時(shí)，請(qǐng)置37℃至溶解。