金蓮橙OOO指示劑公司正在銷售的產品：雞α-內肽(α-EP)試劑盒Anti-WNT1 AntibodyAlexa Fluor 555標記的兔抗大鼠IgG
雞CCAAT增強子結合蛋白γ(C/EBPγ)試劑盒 Anti-WISP1 AntibodyAlexa Fluor 647標記的兔抗大鼠IgG
雞血管內皮生長因子C(VEGF-C)試劑盒Anti-WNT10A AntibodyPE-Cy5.5標記的

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產品分類：指示劑

儲存條件：室溫,避光,12個月

用途：單一酸堿指示劑

注意事項：金蓮橙OOO又稱橙黃II,桔黃II或者酸性橙7第一變色范圍：7.6-8.9,顏色由綠色變?yōu)槊倒迳坏诙兩秶?0.3-12.0,顏色由黃色變?yōu)榧t色。

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。

巨大芽胞桿菌錨定蛋白G抗體Human LRRC52 ELISA Kit豬Ⅶ(FⅦ)免疫試劑盒

杰丁塞伯林德納氏酵母肌動蛋白α/α-SMA/α Actin抗體Human LRWD1(Leucine-rich repeat and WD repeat-containing protein 1) ELISA Kit豬Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒

淡黃濕傘整合樣金屬蛋白與凝血1型抗體Human LRSAM1 ELISA Kit豬凝血抗凝血復合物(TAT)免疫試劑盒

Streptomyces setonensis Shomura整合樣金屬蛋白與凝血1型-7抗體 (N端抗體)Human LSAMP ELISA Kit豬腦鈉(BNP)免疫試劑盒

單核增生李斯特氏菌整合樣金屬蛋白與凝血1型-7抗體Human LSG1 ELISA Kit豬鈉-葡萄糖共轉運載體1(SGLT1)免疫試劑盒

黑曲霉內收蛋白抗體Human LRRC29 ELISA Kit豬內皮型一氧化氮合成(eNOS)免疫試劑盒

梨形卷枝霉脂肪組織分化相關蛋白抗體Human LSM1 ELISA Kit豬內皮1(ET-1)免疫試劑盒

假絲酵母屬脂聯受體1抗體Human LRRC4C ELISA Kit豬末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)免疫試劑盒

鼠李糖小短桿菌腎上腺髓質受體抗體Human LRRC18 ELISA Kit豬繆勒管抑制物質/抗繆勒管激(AMH)免疫試劑盒

釀酒酵母脂聯抗體Human LSG1 ELISA Kit豬免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒

分枝桿菌腎上腺髓質抗體Human LRRC52 ELISA Kit豬免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒

蒙古口蘑腺苷受體A3抗體Human LRRC20 ELISA Kit豬免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒

產氣莢膜梭菌 C型ADRA2腎上腺能受體2抗體Human LRCH3 ELISA Kit豬免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒

鏈霉菌腎上腺能受體β1抗體Human LRCH2 ELISA Kit豬糜蛋白免疫試劑盒

凍土毛霉腎上腺能受體β2/β2-AR抗體Human LRPPRC ELISA Kit豬流行性乙型腦炎抗體(IgG)免疫試劑盒

樟疫霉晚期糖基化終末產物抗體Human LRP2BP ELISA Kit豬磷脂A2(PLA2G1B)免疫試劑盒

#金針菇Flammulina│velutipes var. velutipes (Curtis) Singer 質量規(guī)格：BR補體片斷3b試劑盒竹紅菌

費希新薩托菌Neosartorya│fischeri 質量規(guī)格：>99%,BR補體片斷3a試劑盒藏紅花

匍枝根霉(黑根霉)Rhizopus│stolonifer 質量規(guī)格：BR補體片段4d試劑盒cis-紫莖女貞苷B
金蓮橙OOO指示劑Human P27 protein ELISA Kit  人P27蛋白規(guī)格： 48T

P-gp(Human permeability glycoprotein) ELISA Kit  人P糖蛋白/滲透性糖蛋白規(guī)格： 48T

CCSA-3(Human colon cancer-specific antigen-3) ELISA kit  人大腸癌專一抗原3規(guī)格： 48T

CCSA-2(Human colon cancer-specific antigen-2) ELISA kit  人大腸癌專一抗原2規(guī)格： 48T

CCSA-4(Human colon cancer-specific antigen-4) ELISA kit  人大腸癌專一抗原4規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。