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詳細介紹
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/24樣 |
產品貨號 | AS63212 |
商品介紹：
測定意義 NADK（EC 2.7.1.23）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，是目前所發現的生物體內惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶，可催化NAD(H)以ATP或無機多聚磷酸[poly(P)]作為磷酰基供體進行磷酸化反應，生成NADP(H)。因此，NAD激酶在合成NADP(H)以及調節NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。 測定原理 NADK催化NAD+磷酸化，生成NADP+；NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH；NADPH通過PMS的遞氫作用，還原氧化型噻唑藍（MTT），通過在600 nm下測定MTT的還原速度（吸光值的變化）可反映出NADK活性的大小。 需自備的儀器和用品 可見分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
粘蛋白/粘液1(MUC1)英文名：MUC1 ELISA Kit血管生成相關蛋白6抗體包裝1g
再生基因蛋白1a(REG-1a)英文名：REG-1a ELISA KitMuellerian繆勒管激抑制因子抗體包裝5g
載脂蛋白H(Apo-H)英文名：Apo-H ELISA Kit酪蛋白激受體A8抗體包裝1g
載脂蛋白E(Apo-E)英文名：Apo-E ELISA Kit脂肪酰家族成員1抗體包裝5g
載脂蛋白B48(apo-B48)英文名：apo-B48 ELISA Kit芳香烴受體核轉錄蛋白樣2抗體包裝100mg
載脂蛋白B100(apo-B100)英文名：apo-B100 ELISA Kit磷化芳香N-乙酰化轉移抗體包裝1g
載脂蛋白B100(Apo B100)英文名：Apo B100 ELISA Kit肌動蛋白結合蛋白1抗體包裝500mg
載脂蛋白B(ApoB)英文名：ApoB ELISA Kit粘附分子IgG樣結構域蛋白2抗體包裝5g
載脂蛋白A5(apo-A5)英文名：apo-A5 ELISA Kit肌動蛋白結合蛋白DOC6抗體包裝100mg
載脂蛋白A1(apo-A1)英文名：apo-A1 ELISA KitAFG3樣蛋白2/脊髓小腦共濟失調蛋白28抗體包裝500mg
載脂蛋白A1(Apo A1)英文名：Apo A1 ELISA Kit激活受體相互作用蛋白1抗體包裝1g
孕受體(PROGR)英文名：PROGR ELISA Kit固類還原家族7成員A2抗體包裝5g
孕(PROG)英文名：PROG ELISA Kit蛋白激AKT1,2,3抗體包裝25g
孕激/孕(PROG)英文名：PROG ELISA Kit帕金森病相關蛋白ATP13A2抗體包裝5g
誘導型一氧化合成(iNOS)英文名：iNOS ELISA Kit肌側索硬化蛋白2抗體包裝100g
繆勒激2型受體抗體Ⅱ型膠原(COL2)AT-406 是一種有效的，可口服的 Smac 模擬物，為 IAPs 的拮抗劑，能夠抑制 XIAP，cIAP1 和 cIAP2 蛋白，Ki 值分別為 66.4，
NAD激酶（NADK）測試盒50管/24樣空泡單胞 N-2-乙酰基鳥Ⅰ型前膠原羧基端肽Elisa
都柏林沙門氏 肝瓊脂糖凝膠CL-6BⅡ型肺泡表面抗原Elisa
畢赤酵母屬 聚氧乙烯氫化Ⅱ型膠原C端肽Elisa
枯草芽孢桿 (-)-莰Ⅱ型膠原抗體Elisa
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少根根霉 油酸乙酯Ⅲ型前膠原氨基端肽Elisa
大腸埃希氏○抗原微量凝集定型血清診斷液 ○106 3'-甲氧基-5'-羥基異黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷Ⅳ型膠原Elisa
釀酒酵母 Ⅳ型膠原蛋白Elisa
殼多胞屬 鼠尾草酸Elisa
粗壯假絲酵母 蜂膠Ⅸ型膠原蛋白Elisa
運動節桿 甲基紫精adropinElisa
枯草芽孢桿 月桂聚氧乙烯硫酸鈉AKT蛋白Elisa
Pseudomonas argentinensis DA201-C樹脂AP2A2Elisa
馬腺疫鏈球獸疫亞種 1，1-二苯基-2-苦基肼脂肪炎癥因子Elisa
枯草芽孢桿 長春apelin 12Elisa
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