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DNaseⅠ溶液

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更新時間:2022-08-30 09:43:53瀏覽次數:358

聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現貨 規格 1ml
貨號 FS-R7329 應用領域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R7329
DNaseⅠ溶液 公司正在銷售的產品:Anti-Phospho EEF1A2 (Ser358) Antibody人腫瘤特異性移植抗原
Anti-Phospho EIF2AK3 (T981) Antibody大鼠肺表面活性物質相關蛋白A
Anti-Phospho ELK1 (Ser383) Antibody小鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉
Anti-Phospho E41 (Tyr660) Antibo

詳細介紹

產品分類:DNA溶液

儲存條件:—20℃,12個月

用途:多用于無DNA污染的RNA的制備,逆轉錄及體外轉錄等實驗。

注意事項:主要由DNaseⅠ、等組成。25~37℃孵育10min。

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產品名稱

規格

貨號

DNaseⅠ溶液  

1ml

FS-R7329

 

63.jpg 

 

配制與標定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

13.jpg 

 

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1)  轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5)   之后更換正常培養基培養即可。

貝倫格葡萄座腔菌梨生專化型豬胰島單克抗體Human SAA4(Serum amyloid A-4 protein) ELISA Kit載脂蛋白B48(apo-B48)

釀酒酵母KB抑制蛋白激α/IκBα/IKK-α/IKKα/I-κB-α 抗體Human RAB11FIP3 ELISA Kit載脂蛋白B100(apo-B100)

澳型核果褐腐病菌抗重組人胰島抗體Human ENPP1(Ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase family member 1) ELISA Kit載脂蛋白A5(apo-A5)

產皮歐(票)霉鏈霉菌磷化肌聚磷鹽磷樣蛋白1抗體Human RAB11FIP5 ELISA Kit載脂蛋白A4(Apo-A4)

氏蜜環菌胰島受體抗體Human PVRL4 ELISA Kit載脂蛋白A2(apo-A2)

釀酒酵母胰島受體α抗體Human PXMP2 ELISA Kit載脂蛋白A1(apo-A1)

石泉海源菌胰島受體β抗體Human PWP1 ELISA Kit載脂蛋白A1(apo A1)

猴假單胞菌KB抑制蛋白激α/β抗體Human PWP2 ELISA Kit運甲狀腺蛋白/前白蛋白(TTR)

鹽漬喜鹽芽孢桿菌白介12抗體Human RABGAP1L ELISA Kit孕烯(PREG)

聚團屈撓桿菌干擾誘導35蛋白抗體Human PCK2(Phosphoenolpyruvate carboxykinase [GTP], mitochondrial) ELISA Kit孕受體(PGR)

菊池鏈格孢完整膜蛋白E25A抗體Human CYP27B1(25-hydroxyvitamin D-1 alpha hydroxylase, mitochondrial) ELISA Kit孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)

弗雷德里克斯堡假單胞菌小腸型脂肪結合蛋白抗體Human RABGEF1 ELISA Kit孕(PROG)

日本擬無枝菌胰島降解抗體Human PYGO2 ELISA Kit孕激誘導阻斷因子(PIBF)

禽腺病Ⅴ型KB抑制蛋白激β抗體Human PWP2 ELISA Kit孕激/孕(PROG)

淺黃曲霉白介17受體D抗體Human PYCR1 (Pyrroline-5-carboxylate reductase 1, mitochondrial)ELISA Kit遠端上游元件結合蛋白1(FUBP1)

根瘤菌白介-17B抗體Human PXMP2 ELISA Kit原纖維蛋白-1(FBN1)

平展單頂孢Monacrosporium│effusum 質量規格:>99.5%(GC),標準物質知母皂苷BII

解淀粉周培瑾氏菌Zhouia│amylolytica 質量規格:>99.5%(GC),標準物質10-脫乙酰巴亭

淺綠灰鏈霉菌Streptomyces│glauciniger 質量規格:>98.0%(GC)(T)安格洛甙C
DNaseⅠ溶液  FT4 ELISA Kit  大鼠游離jia狀腺su規格: 48T

Free-T3 ELISA Kit  大鼠游離三碘jia狀腺原氨suan規格: 48T

NN-T4 ELISA Kit  大鼠新生jia狀腺su規格: 48T

INS ELISA Kit  大鼠胰島su規格: 48T

C-Peptide ELISA Kit  大鼠C肽規格: 48T


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