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小牛血清使用注意事項及細胞毒性評估方法
閱讀：643 發布時間：2024-10-23小牛血清在生物實驗和細胞培養中至關重要，但其使用需嚴格遵守以下注意事項：
供血來源：供血的新生小牛必須是健康牛的產仔，并在產后24小時內抽血，期間不得吸取母乳。
無菌操作：以無菌操作自頸動脈放血，并在無菌條件下分離血清及濾菌，全過程需在36小時內完成。
保存條件：濾菌后的血清需妥善保存，確保其質量和穩定性。
質量檢測：使用前需進行細菌、支原體培養及內毒素測定，確認無污染后方可使用。
總蛋白含量測定：每批小牛血清應測定總蛋白含量，并分別配成不同濃度進行細胞培養，觀察其細胞毒性。
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細胞毒性評估方法
觀察小牛血清的細胞毒性可采用多種方法，包括：
MTS比色法：基于活細胞還原MTS產生甲瓚產物的原理，通過測定甲瓚產物的吸光度來評估細胞存活率和增殖情況。
細胞生長曲線測定：通過繪制細胞在不同濃度小牛血清中的生長曲線，觀察小牛血清對細胞增殖的影響。
細胞形態觀察：利用顯微鏡觀察細胞形態，直觀了解細胞在含有小牛血清的培養基中的生長狀態。
克隆形成率測定：通過測定克隆形成率來評估小牛血清對細胞增殖和存活的影響。
乳酸脫氫酶（LDH）釋放試驗：通過測定培養液中LDH的含量來反映細胞膜的完整性和細胞的損傷程度。
綜上所述，根據實驗需求和條件，可以選擇合適的方法進行小牛血清的細胞毒性評估。