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關于支原體培養的相關知識

支原體定義：

  支原體（mycoplasma）是一類沒有細胞壁、高度多形性、能通過濾菌器、可用人工培養基培養增殖的最小原核細胞型微生物。由于能形成絲狀與分枝形狀，故稱為支原體。支原體廣泛存在于人和動物體內，大多不致病，對人致病的支原體主要有肺炎支原體、溶脲脲原體、人型支原體、生殖器支原體等。

支原體結構：

  支原體的大小為0.1～0.3um，可通過濾菌器，常給細胞培養工作帶來污染的麻煩。菌落小（直徑0.1-1.0mm），在固體培養基表面呈*的"油煎蛋"狀。無細胞壁，不能維持固定的形態而呈現多形性，對滲透壓敏感，對抑制細胞壁合成的抗生素不敏感。革蘭氏染色不易著色，故常用Giemsa染色法將其染成淡紫色。細胞膜中膽固醇含量較多，約占36%，對保持細胞膜的完整性具有一定作用。細胞膜含甾醇，比其他原核生物的膜更堅韌。凡能作用于膽固醇的物質均可引起支原體膜的破壞而使支原體死亡。

   支原體基因組為一環狀以雙鏈DNA，分子量小（僅有大腸桿菌的五分之一），合成與代謝很有限。

   肺炎支原體的一端有一種特殊的末端結構（terminal structure），能使支原體粘附于呼吸道粘膜上皮細胞表面，與致病性有關。

支原體分類：

  一般能分解葡萄糖的支原體則不能利用精氨酸，能利用精氨酸的則不能分解葡萄糖，據此可將支原體分為兩類。解脲支原體不能利用葡萄糖或精氨酸，但可利用尿素作能源。

   各種支原體都有特異的表面抗原結構，很少有交叉反應，具有型特異性。應用生長抑制試驗（Growth inhibition test,GIT）、代謝抑制試驗（Metabolic inhibition test,MIT）等可鑒定支原抗原，進行分型。

   它廣泛分布于自然界，有80余種。與人類有關的支原體有肺炎支原體（M-pneumonie，Mp）、人型支原體（UU 分解尿素支原體）和生殖器支原體（M.genitalium，MG）等。

   肺炎支原體引起肺炎。現已從人類泌尿生殖道分離出來7種支原體，其中分離率較高而與泌尿生殖道疾病有關，是解脲支原體，其次是人型支原體。人型支原體（M.humenis，MH）、解脲支原體（Ureaplasma urealyticum，UU）和生殖器支原體（M.genitalium，MG）都會引起泌尿生殖道感染。

    自然界中廣泛存在絕大多數生長需膽固醇，在遺傳上與細菌無關，且無論在什么條件下也不能變成細菌菌落較小，0.1～0.3mm。

培養條件：

  營養要求比一般細菌高，除基礎營養物質外還需加入10～20%人或動物血清以提供支原體所需的膽固醇。最適pH7.8～8.0之間，低于7.0則死亡，但解脲支原體最適pH6.0～6.5。

   大多數兼性厭氧，有些菌株在初分離時加入5%CO2生長更好。生長緩慢，在瓊脂含量較少的固體培養基上孵育2～3天出現典型的“荷包蛋樣"菌落：圓形（直徑10～16um），核心部分較厚，向下長入培養基，周邊為一層薄的透明顆粒區。此外，支原體還能在雞胚絨毛尿囊膜或培養細胞中生長。