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蛋白定量試劑Bradford蛋白濃度測定試劑盒
貨號:PC0010
規格:2500T
保存:開封使用后請密封保存,本試劑盒自訂購之日起九個月內有效。
產品內容:
組成 | 包裝(2500 微孔) | 保存 |
5×G250 染色液 | 100ml | 2-8℃ |
PBS 稀釋液 | 30ml | 2-8℃ |
蛋白標準(5mg/ml BSA) | 1ml | -20℃ |
產品簡介:
考馬斯亮蘭 G-250 染料,在酸性溶液中與蛋白質結合,使染料的大吸收峰的位置(Imax),由 465nm 變為 595nm,在一定的濃度范圍內,測定的吸光度值 A595 與蛋白質濃度成正比。Bradford 法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質的影響,樣品中巰基乙醇的濃度可高達 1M,二硫蘇糖醇的濃度可高達 5mM,但受略高濃度的去垢劑影響,需確保 SDS 的濃度低于 0.1%,Triton X-100 低于 0.1%,Tween 20, 60, 80 低于 0.06%。
含去垢劑的樣品推薦使用索萊寶生產的 BCA 蛋白濃度測定試劑盒。
操作說明:
一.微孔酶標儀法
1. *溶解蛋白標準品,取 10ul,稀釋 250ul ,使終濃度為 0.2mg/ml。待測蛋白樣品在什么溶液中,標準品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡便起見,也可以用 0.9%NaCl 或 PBS 稀釋標準品。
2. 5×G250 染色液使用前請顛倒 3-5 次混勻, 取 1ml 5×G250 染色液, 加入 4ml 雙蒸水, 混勻成 1×G250染色液,此 1×G250 染色液可在 4℃保存一周。
3. 將標準品按 0,2,4,6,8,12,16,20 微升分別加到 96 孔板中,加 PBS 稀釋液補足到 20 微升。
4. 將樣品作適當稀釋(好多做幾個梯度,如作 2 倍、4 倍、8 倍稀釋),加 20 微升到 96 孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時的誤差,標準線前面的點可能不很準確,所以盡可能的讓樣品點落在標準線 1/2 后。
5. 各孔加入 200 微升稀釋后的 1×G250 染色液,室溫放置 3-5 分鐘。
6. 用酶標儀測定 A595,或 560-610nm 之間的其它波長的吸光度。
7. 根據標準曲線計算出樣品中的蛋白濃度。
二.分光光度計法
如無酶標儀,染色反應可在離心管中進行,反應液混勻后加入比色皿中,使用分光光度計測定吸光值。
步驟如下:
1. 取八支(或者更多)干凈的 10ml 離心管,標記上號。
2. 取 100ulBSA 加入 PBS 2.4ml 稀釋終濃度為 0.2mg/ml。
3. 5×G250 染色液使用前請顛倒 3-5 次混勻,取 10ml 5×G250 染色液,加入 40ml 雙蒸水,混勻成 1×G250 染色液,此 1×G250 染色液可在 4℃保存一周。
4. 按下表加入試劑(以每孔 5ml 計,多余的用來清洗比色皿)
5. 反應 3 分鐘后測 OD 值。為了實驗的準確性,可每間隔 2 分鐘加一管染色液,每間隔 2 分鐘測一管 OD值。如下表:
相關產品:
PC0001 BSA 標準品( 5mg/ml )
PC0015 5×G250( 蛋白定量用 )
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R0050 核蛋白抽提試劑盒
蛋白定量試劑Bradford蛋白濃度測定試劑盒訂購說明:
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蛋白定量試劑Bradford蛋白濃度測定試劑盒運輸說明:
1、極低溫產品:極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產品:低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
3、常溫產品:常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。