大鼠牙齦成纖維原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠牙齦成纖維細胞分離自牙齦組織；牙齦指緊貼于牙頸周圍及鄰近的牙槽骨上淡紅色的結構，由復層扁平上皮及固有層組成。是口腔黏膜的一部分，血管豐富，呈淡紅色，堅韌而有彈性，因缺乏黏膜下層，直接與骨膜緊密相連，故牙齦不能移動。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠牙齦成纖維細胞采用蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠牙齦成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

KM小鼠未分化神經膠質瘤瘤株;B22  Caco-2(人結直腸腺癌細胞)     EPHB2 Others Human 人 EphB2 / Hek5 (aa 570-987) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Brisbane 兔原代胸腺成纖維細胞 兔原代前列腺基底細胞

絲蛋白酶1(PRSS1)重組蛋白 Recombinant Protease, Serine 1 (PRSS1)

GCK Protein Human 重組人 Glucokinase / GCK 蛋白

IL1RL1重組人 IL1RL1 / DER4 蛋白 Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

KIRREL重組人 KIRREL / NEPH1 / KIRREL1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

大鼠上皮性鈣黏附蛋白(CDHE)試劑盒 ，英文名： CDHE ELISA Kit

Mouse cardiac anscription factor GATA4 ELISA Kit 小鼠心肌轉錄因子GATA4 試劑盒

RatSomatostatin,SSELISAKit 大鼠(SS)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHAMA(Humanaimousaibody)ELISA人抗鼠抗體

細胞半胱蛋白酶-6(CASPASE-6)活性比色法定量試劑盒20次

RatVitaminA,VAELISAKit大鼠A(VA)試劑盒規格：96T/48T

兔子Ⅲ型膠原(ColⅢ)試劑盒   96T/48T

兔子Ⅱ型膠原(ColⅡ)試劑盒   96T/48T

兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒   96T/48T

兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)試劑盒   96T/48T

大鼠牙齦成纖維原代細胞小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human blood coagulation factor XII (F XII) ELISA Kit 人Ⅻ(FⅫ)試劑盒

Humanpro-gasin-releasingpeptide,ProGRPELISAKit 人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human20-hydroxyeicosateaenoicacid,12-HETE試劑盒人12羥二十烷四烯酸(12-HETE)試劑盒規格：96T/48T

真菌/酵母纖維二糖酶(cellobiase)活性比色法定量試劑盒20次

MouseApolipoproteinH,Apo-HELISAKit小鼠載脂蛋白H(Apo-H)試劑盒規格：96T/48T

NMNAT1重組人 NMNAT1 / NMNAT 蛋白 Protein

SPAG5/map126 相關抗原5(多肽抗原 0.5mgSPAG5/map126 相關抗原5(多肽抗原)

GPC3重組人 Glypican 3 / GPC3 / OCI-5 蛋白 Protein

HIST2H4A Protein Human 重組人 Histone H4 / HIST2H4A 蛋白

PTPN1 Protein Human 重組人 PTP1B / PTPN1 蛋白