大鼠骨髓單核原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 巨噬細胞樣

傳代特性 不增殖；不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠骨髓單核細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單核細胞是一種未成熟的單核細胞，在骨髓細胞中約占0.04%，被認為是破骨細胞的前體細胞，較外周血單個核細胞誘導的破骨細胞得率高、全骨髓誘導法產(chǎn)生的破骨細胞數(shù)量多，純度高，較脾細胞誘導法分化效率高。骨髓單核細胞（BMMNCs）是從股骨或脛骨骨髓中分離提取出來的原代細胞，它屬干細胞類型。目前，大多數(shù)研究用淋巴細胞分離液分離提取骨髓單核細胞，近也有采用免疫磁珠分離法分離骨髓單核細胞。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠骨髓單核細胞采用密度梯度離心法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠骨髓單核細胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

HEC-1-A(人子宮內膜腺癌細胞)  CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細胞) 獼猴皮膚細胞;MMS7  HFSF細胞，人胚胎眼鞏膜成纖維細胞 啤酒酵母 小鼠髖動脈內皮細胞;PIEC  TIGIT Others Human 人 TIGIT / VSTM3 小鼠原代大隱靜脈內皮細胞 兔原代脊髓神經(jīng)元細胞

Adipo R2(adiponectin receptor 2 0.5mgAdipo R2(adiponectin receptor 2) 脂聯(lián)素受體-2(抗原)

FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽), Biotinylated

CXADR重組小鼠 CXADR 蛋白 Protein

IL13RA1 Protein Rat 重組大鼠 IL13RA1 蛋白 (Fc 標簽)

AGER重組人 AGER / RAGE 蛋白 Protein

大鼠細胞外信號調節(jié)激酶2(ERK2)試劑盒 ，英文名： ERK2 ELISA Kit

Mouse nerve growth guidance factor Slit2 ELISA Kit 小鼠神經(jīng)生長導向因子Slit2 試劑盒

MouseCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit 小鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HSV-IIgG單皰疹Ⅰ型病毒IgG(間接法二步法)

細胞ITK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitIL-3大鼠白介素3

小鼠骨粘連蛋白(ON)試劑盒   96T/48T

小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒   96T/48T

小鼠骨形成蛋白(BMPs)試劑盒   96T/48T

小鼠骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)試劑盒   96T/48T

大鼠骨髓單核原代細胞小鼠抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat ai glucoprotein 210 (gp210) ELISA Kit 大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)試劑盒

HumanCardiacmyosin-lightchains1,CMLC-1ELISAKit 人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAmylin試劑盒人胰淀素(Amylin)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物蛋白巰基/結合巰基含量熒光定量試劑盒20次

MonkeyInsulin,INSELISAKit猴胰島素(INS)試劑盒規(guī)格：96T/48T

EFNA5重組大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 Protein

H5N1-M2(Avian influenza Matrix Protein-2 0.5mgH5N1-M2(Avian influenza Matrix Protein-2) H5N1流感病毒M2型(抗原)

SLAMF6重組人 SLAMF6 / Ly108 蛋白 Protein

FCER1A Protein Human 重組人 FcERI / FCER1A 蛋白

MAP2K1 Protein Mouse 重組小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 蛋白 (His & GST 標簽)