大鼠肺泡巨噬原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 巨噬細胞樣

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠肺泡巨噬細胞分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。肺泡由單層上皮細胞構(gòu)成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經(jīng)多次反復分枝成無數(shù)細支氣管，它們的末端膨大成囊，囊的四周有很多突出的小囊泡，即為肺泡。巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應(yīng)。肺泡巨噬細胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍，有重要防御功能。肺泡是重要的巨噬細胞儲存器官，為結(jié)核病的研究提供了重要的材料。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠肺泡巨噬細胞采用PBS灌注結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠肺泡巨噬細胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM3 / HAVCR2 人細胞裂解液   IL5 Others Canine 狗 IL5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   CL-0145LS-174T(人結(jié)腸腺癌細胞)  長尾綠猴腎細胞;4647 小鼠原代肺巨噬細胞 人原代骨髓巨噬細胞

STAT3(signal transducers and activators of transduction3 0.5mgSTAT3(signal transducers and activators of transduction3) 信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗原

FZD10 Protein Human 重組人 Frizzled-10 / FZD10 蛋白 (Fc 標簽)

DARS重組人 DARS 蛋白 Protein

SLITRK1 Protein Human 重組人 SLITRK1 蛋白 (His & Fc 標簽)

YWHAE重組人 14-3-3 epsilon / YWHAE 蛋白 (GST 標簽) Protein

大鼠纖維介素蛋白(FGL2)試劑盒 ，英文名： FGL2 ELISA Kit

Mouse heat shock protein 96 (HSP gp96) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)試劑盒

MouseSolubleIercellularAdhesionMolecule1,sICAM-1ELISAKit 小鼠可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforHumanAgoiRelatedProtein,AGRPELISAKit人Agoi相關(guān)蛋白

細胞HHV6-B(HUMANHERPESVIRUS6-B)病毒定量PCR擴增試劑盒20次

ELISAKitCFH大鼠補體因子H

小鼠DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)試劑盒   96T/48T

小鼠C型尿肽(CNP)試劑盒   96T/48T

小鼠C肽(C-Peptide)試劑盒   96T/48T

小鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)試劑盒   96T/48T

大鼠肺泡巨噬原代細胞小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human homocysteic acid (Hcy) ELISA Kit 人同型半胱(Hcy)試劑盒

Humanapoptosissignalregulatingkinase1,ASK-1ELISAKit 人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanBullousPemphigoid,BP試劑盒人大皰性類天皰瘡抗體(BP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次

HumansolubleTumorNecrosisFactorαreceptor，sTNFαRELISAKit人可溶性壞死因子α受體(sTNFαR)試劑盒規(guī)格：96T/48T

SERPINB6B重組小鼠 Serpinb6b 蛋白 Protein

白介素12受體β2(IL2Rβ2)重組蛋白 Recombinant Interleukin 12 Receptor Beta 2 (IL12Rb2)

SAE1重組人 SAE1 蛋白 Protein

DPP10 Protein Human 重組人 DPP10 / DPRP3 蛋白

TNFSF4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 OX-40L / TNFSF4 蛋白 (Fc 標簽)