大鼠肺動(dòng)脈成纖維原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：大鼠原代肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞 NCI-H205(人上腺腺瘤細(xì)胞) IMR-32 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 1ml/T75 Caco-2，人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 Human HES 人胚皮膚成纖維樣細(xì)胞 大鼠原代胰島β細(xì)胞

大鼠肺動(dòng)脈成纖維原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞分離自肺動(dòng)脈組織；肺動(dòng)脈亦稱肺動(dòng)脈干。在呼吸空氣的脊椎動(dòng)物中，把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動(dòng)脈。肺大動(dòng)脈起于右心室，在主動(dòng)脈之前向左上后方斜行，在主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈，經(jīng)肺門入肺。肺動(dòng)脈干位于心包內(nèi)，為一粗短的動(dòng)脈干。起自右心室，在升主動(dòng)脈前方向左后上方斜行，至主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈。左肺動(dòng)脈較短，在左主支氣管前方橫行，分二支進(jìn)入左肺上、下葉。右肺動(dòng)脈較長而粗，經(jīng)升主動(dòng)脈和上腔靜脈后方向右橫行，至右肺門處分為三支進(jìn)入右肺上、中、下葉。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持肺動(dòng)脈的正常形態(tài)；合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)；組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

HAVCR1 Others Human 人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細(xì)胞裂解液   大鼠背脊髓神經(jīng)元RN-dsc  PLAUR Others Mouse 小鼠 uPAR / PLAUR / CD87 人細(xì)胞裂解液   BMP2 Protein Human 重組人 BMP-2 小鼠原代肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 人原代結(jié)腸間質(zhì)細(xì)胞

alpha Adaptin/AP1 銜接蛋白α抗原 0.5mgalpha Adaptin/AP1 銜接蛋白α抗原

CPLX2 Protein Human 重組人 Complexin-2 / CPLX2 蛋白

IL6ST重組小鼠 IL6ST / gp130 / CD130 蛋白 Protein

BST1 Protein Rat 重組大鼠 CD157 / BST1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

C1D重組人 C1D 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

大鼠纖維連接蛋白(FN)試劑盒 ，英文名： FN ELISA Kit

Mouse collagenase type II (Collagenase II) ELISA Kit 小鼠膠原酶II(Collagenase II)試劑盒

Mouse6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit 小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanPeptideYYELISAKit人多肽YY

同位素[α32P]dCTP聚合酶標(biāo)記微衛(wèi)星擴(kuò)增試劑盒20次

ELISAKitxR大鼠硫氧還蛋白還原酶

小鼠IgG(mouse IgG)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠IgM(mouse IgM)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠白介素-1a(mouse IL-1a)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠白介素-1b(mouse IL-1b)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

大鼠肺動(dòng)脈成纖維原代細(xì)胞小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat heat shock protein 20 (HSP-20) ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒

Humanglucokinaseregulatoryprotein,GKRPELISAKit 人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanC-typenaiureticpeptide,CNP試劑盒人C型尿肽(CNP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物組織質(zhì)膜(plasmamembrane)分離試劑盒20次

Humansolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sAILELISAKit人可溶性壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CXADR重組小鼠 CXADR 蛋白 Protein

Adipo R2(adiponectin receptor 2 0.5mgAdipo R2(adiponectin receptor 2) 脂聯(lián)素受體-2(抗原)

AGER重組人 AGER / RAGE 蛋白 Protein

FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated

IL13RA1 Protein Rat 重組大鼠 IL13RA1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。