大鼠成骨原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠成骨細胞分離自顱骨組織；顱骨位于脊柱上方，由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成。除下頜骨及舌骨外，其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié)，起著保護和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部，內(nèi)有顱腔，容納腦，共8塊。面顱為顱的前下部分，包含眶、鼻腔、口腔等結(jié)構(gòu)，構(gòu)成面部的支架，共15塊。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞，負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成、分泌和礦化。骨不斷地進行著重建，骨重建過程包括破骨細胞貼附在舊骨區(qū)域，分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì)，分泌蛋白酶消化骨基質(zhì)，形成骨吸收陷窩；其后，成骨細胞移行至被吸收部位，分泌骨基質(zhì)，骨基質(zhì)礦化而形成新骨；破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵。成骨細胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機制、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細胞學(xué)基礎(chǔ)，也是藥物篩選、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠成骨細胞采用先用蛋白酶短時間消化、后用膠原酶反復(fù)消化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠成骨細胞經(jīng)ALP染色檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

HA Others H6N1 甲型流感 H6N1 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液   小鼠癌細胞;CCC-Ca761-03 小鼠外周血白細胞 CD200R1 Others Human 人 CD200R1 人細胞裂解液   CCL17 小鼠原代腹腔巨噬細胞 兔原代腹腔主動脈平滑肌細胞

Isulin 胰島素(抗原 0.5mgIsulin 胰島素(抗原)

CD58 Protein Human 重組人 LFA-3 / CD58 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

FGFR4重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 Protein

NAALADL1 Protein Mouse 重組小鼠 NAALADL1 蛋白

FAM3D重組人 FAM3D 蛋白 Protein

大鼠線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)試劑盒 ，英文名： UCP1 ELISA Kit

Pla vitamin E (VE) ELISA Kit 植物(VE)試劑盒

MouseImmunoglobulinE,IgEELISAKit 小鼠免疫球蛋白E(IgE)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit人血漿α顆粒膜蛋白

細胞HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定性試劑盒20次

ELISAKitSOD大鼠超氧化物歧化酶

小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)試劑盒   96T/48T

小鼠血小板因子3(PF-3)試劑盒   96T/48T

小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)試劑盒   96T/48T

小鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)試劑盒   96T/48T

大鼠成骨原代細胞小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human brain naiuretic peptide / brain naiuretic peptide (BNP) ELISA Kit 人腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒

HumanEsogen-inducedproteinpS2ELISAKit 人雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2試劑盒 96T/48T 進口分裝

guineapigIerferonγ,IFN-γ試劑盒豚鼠γ干擾素(IFN-γ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒20次

MouseCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

GRN重組人 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 Protein

血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(PROCR)重組蛋白 Recombinant Protein C Receptor, Endothelial (PROCR)

NA重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (Fc 標(biāo)簽) Protein

EFNA1 Protein Human 重組人 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白

GP140 Protein HIV 重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype A, strain 92UG037.1) (Fc 標(biāo)簽)

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。