小鼠視網膜色素上皮原代細胞公司正在銷售的產品：小鼠原代視網膜色素上皮細胞 E.G7-OVA(小鼠T淋巴瘤細胞) NAMALWA 人Butt淋巴瘤細胞 1ml/T75 AtT20 小鼠垂體瘤細胞 COS-7 非洲綠猴SV40轉化的細胞 人原代肝動脈平滑肌細胞

小鼠視網膜色素上皮原代細胞

培養信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養法

　?、?懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　?、芷鞴倥囵B

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

小鼠視網膜色素上皮細胞分離自視網膜組織；視網膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視神經乳頭。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。第一神經元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上，而視錐細胞則在中心凹處最多。第二層叫雙節細胞，約有10到數百個視細胞通過雙節細胞與一個神經節細胞相聯系，負責聯絡作用。第三層叫節細胞層，專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面，經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區，其分辨能力。視網膜色素上皮（RPE）位于脈絡膜和光感受器細胞外節之間，是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養物質和代謝終產物轉運通道；主要是由單層色素上皮細胞所構成，排列十分規則。，吞噬脫落的光感受器細胞外節以維持光感受器細胞興奮性，并分泌多種生長因子，幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠視網膜色素上皮細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠視網膜色素上皮細胞經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

FAM3D Protein Human 重組人 FAM3D 蛋白 (His 標簽)  NCI-H661(人大細胞肺癌細胞)     人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2  小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T3 小鼠骨髓基質細胞 Li-7人肝癌細胞 Li-7 human 小鼠原代海綿體平滑肌細胞 人原代肝門靜脈成纖維細胞

Gelsolin 凝溶膠蛋白抗原 0.5mgGelsolin 凝溶膠蛋白抗原

FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His 標簽)

CHODL重組大鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白  Protein

BLMH Protein Mouse 重組小鼠 BLMH / Bleomycin Hydrolase 蛋白 (His 標簽)

FH重組人 Fumarate Hydratase / FH 蛋白 (His 標簽) Protein

大鼠氧化酶(XOD)試劑盒 ，英文名： XOD ELISA Kit

Rabbit oponin I (Tn- I) ELISA Kit 兔肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)試劑盒

腦膜奈瑟菌C群(NM-C)核酸試劑盒 48T

CLIAKitforMouselymphocytefactorELISAKit小鼠淋巴細胞因子

體液過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性化學發光法定量試劑盒20次

ELISAKit2,3-DPG人2,3-二0酸甘油酸

小鼠乙型肝e抗體(HBeAb)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠乙型肝e抗原(HBeAg)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠乙型肝表面抗體(HBsAb)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠氧化酶(DAO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠視網膜色素上皮原代細胞小鼠標志物(CA724)ELISA 試劑盒

Human ai myocardial aibody (EMAb) ELISA Kit 人抗眼肌抗體(EMAb)試劑盒

HumanglathioneS-ansferases,GSTsELISAKit 人S轉移酶(GSTs)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforABM-Ab(Humanalveolibasememembranezoneaibody)ELISAKit人抗肺泡基底膜抗體

伊紅復染試劑盒50次

Mouseniicoxide,NOELISAKit小鼠(NO)試劑盒

IFNA5重組大鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白 Protein

fgL2 (Fibrinogen-like 2 0.5mgfgL2 (Fibrinogen-like 2) 原酶 (又稱：纖維介素蛋白;前凝血素)

PIN1重組人 PIN1 / Rotamase Pin1 蛋白 Protein

DEFB103A Protein Human 重組人 Defensin / Beta-defensin 3 / DEFB103 蛋白

EPHA2 Protein Mouse 重組小鼠 EphA2 蛋白

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。