小鼠食管上皮原代細胞

培養信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠食管上皮細胞分離自食管組織；食管是咽和胃之間的消化管，食管在系統發生上起初很短，隨著頸部的伸長和心肺的下降，而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內，胸段通過膈孔與腹腔內腹相連，腹段很短與胃相連。在發育過程中，食管的上皮細胞增殖，由單層變為復層，食管使管腔變狹窄，甚至一度閉鎖，以后管腔又重新出現。哺乳動物的食管結構上由內向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，黏膜層，包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復層扁平上皮，耐摩擦，有保護作用。在食管與胃賁門交界處，復層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的、無角化、潮濕的復層扁平上皮細胞覆蓋，其頂端細胞膜和細胞間連接復合體聯合在一起產生有效滲透屏障，防止食管內容物的滲入。特別的是，層屏障使表層細胞的基質外側細胞膜和深層細胞的全部細胞膜不暴露于食管腔內規律的大幅波動的滲透壓之下。從組織學上講，食管上皮由兩層組成，基底層和分化層；其中，僅基底層的細胞可以增殖，然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發生和分化標記的依序表達。食管上皮細胞的培養是研究食管正常生理機制和食管癌變機制的非常好的體外模型。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠食管上皮細胞采用機械分離法結合組織貼塊法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠食管上皮細胞經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

FAM3D Others Human 人 FAM3D 人細胞裂解液   CEM細胞，白血病細胞 人前列腺癌細胞,PC-3M細胞 人肝內膽管上皮細胞總RNAHIBEpiC NA  肺大靜脈內皮細胞Many   中國倉鼠卵巢細胞系;pDSr a2-mpl-X 小鼠原代頜骨骨髓間充質干細胞 大鼠原代乳腺導管上皮細胞

防御素β113(DEFβ113)重組蛋白 Recombinant Defensin Beta 113 (DEFb113)

CLIC4 Protein Human 重組人 CLIC4 蛋白

SEMA5A重組小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白 Protein

FCGRT & B2M Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白

TSPAN8重組人 TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 蛋白 (Fc 標簽) Protein

大鼠氧鯊烯環化酶(OSC)試劑盒 ，英文名： OSC ELISA Kit

Mouse gelsolin (Gelsolin) ELISA Kit 小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)試劑盒

MouseCiliaryNeuroophicFactor,CFELISAKit 小鼠睫狀神經營養因子(CF)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforHumanComplemefragme5a,C5aELISAKit人補體片斷5a

細胞CaMKII激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitOPG大鼠骨保護素

豬低分子肝素(LMWH)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬蛋白激酶A(PKA)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬單核細胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

小鼠食管上皮原代細胞小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human mucosal addressin cell adhesion molecule (MAdCAM-1) ELISA Kit 人黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM-1)試劑盒

HumancytokeratinLowMolecularWeight,CK-LMWELISAKit 人低分子量細胞角蛋白(CK-LMW)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Guineapigierleukin4,IL-4試劑盒豚鼠白介素4(IL-4)試劑盒規格：96T/48T

真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性化學發光法定量試劑盒20次

Mousecarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit小鼠酶2(CA-2)試劑盒規格：96T/48T

M1重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Matrix protein 1 / M1 蛋白 Protein

PT141(Bremelanotide PT-141 1gPT141(Bremelanotide PT-141) 雌性激素肽

RELT重組人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 Protein

FSTL5 Protein Human 重組人 FSTL5 蛋白 (Fc 標簽)

EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His & Fc 標簽)