人肺成纖維原代細(xì)胞公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：人原代肺成纖維細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞 英文名稱(chēng)： Hep 3B Psi2 DAP 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 1ml/T75 GH3, 大鼠垂體生長(zhǎng)激素腺瘤 CatL1 家貓肺成纖維樣細(xì)胞 小鼠原代下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

人肺成纖維原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

人肺成纖維細(xì)胞分離自肺組織；肺是機(jī)體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經(jīng)肺系（指氣管、支氣管等）與喉、鼻相連，故稱(chēng)喉為肺之門(mén)戶，鼻為肺之外竅。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的肺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持肺器官的正常形態(tài)，合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肺成纖維細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肺成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

MGC-803 人胃癌細(xì)胞  NCI-H1975(人肺腺癌細(xì)胞)     STK24 Others Human 人 STK24 / MST3 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液   7130 人絨毛間葉成纖維細(xì)胞(HVT) EPHA1 Others Mouse 小鼠 EphA1 兔原代視網(wǎng)膜muller細(xì)胞 大鼠原代NK細(xì)胞

MADCAM-1 黏膜選址素(抗原 0.5mgMADCAM-1 黏膜選址素(抗原)

ERH Protein Human 重組人 ERH / DROER 蛋白

TNFRSF14重組食蟹猴 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

MAPK1 Protein Mouse 重組小鼠 ERK2 / MAPK1 / MAPK2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標(biāo)簽) Protein

大鼠內(nèi)脂素(VF)試劑盒 ，英文名： VF ELISA Kit

Monkey ierferon alpha (IFN- alpha) ELISA Kit 猴α干擾素(IFN-α)試劑盒

RatcoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit 大鼠Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGlycoproteinVI(Human)ELISAKit人糖蛋白VI

細(xì)胞非蛋白/游離巰基含量比色法定量試劑盒20次

RatSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)試劑盒規(guī)格：96T/48T

雙向調(diào)節(jié)蛋白   英文名稱(chēng)：   Amphiregulin   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   AR

固   英文名稱(chēng)：   Aldosterone   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   Aldosterone

白細(xì)胞活化黏附因子   英文名稱(chēng)：   Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   ALCAM

膜聯(lián)蛋白5   英文名稱(chēng)：   Annexin 5   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   ANXA-5

人肺成纖維原代細(xì)胞豚鼠孕激素(progestogen)試劑盒 ，英文名： progestogen ELISA Kit

Human proteoglycan (PG) ELISA Kit 人蛋白聚糖(PG)試劑盒

Monkeymaixmetalloproteinase11,MMP11ELISAKit基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBMP-4(MouseBonemorphogeneticprotein4)ELISAKit小鼠骨成型蛋白4

細(xì)菌鎂離子濃度化學(xué)比色法定量試劑盒20次

rabbitmaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒規(guī)格：96T/48T

F2重組小鼠 Coagulation Factor II / FII / F2 蛋白 Protein

Annexin II 膜粘連蛋白-2抗原 0.5mgAnnexin II 膜粘連蛋白-2抗原

MSN重組人 MSN / Moesin 蛋白 (aa 1-346, His 標(biāo)簽) Protein

DDOST Protein Human 重組人 DDOST / OST48 蛋白

CD59 Protein Rat 重組大鼠 CD59 / CD59A / MAC / IP 蛋白