豬附紅細胞體(SEP)核酸檢測試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品：小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶A2(Lp-PLA2)PCR檢測試劑盒 ，英文名： Lp-PLA2
小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA檢測試劑盒MouseSerumamyloidA,SAAELISAKit 50T
人巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫試劑盒 Human MIP-3α
Rataldehydedehydrogena

操作流程
收集基因信息——>設(shè)計引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細胞做轉(zhuǎn)化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質(zhì)粒抽提——>質(zhì)粒測序——>測序結(jié)果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質(zhì)粒實物保存。

PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix （2mM）
4 μl     引物1（10pM）
2 μl     引物2（10pM）
2 μl     Taq酶 （2U/μl）
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl      加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
下列相關(guān)產(chǎn)品：
小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)PCR檢測試劑盒 ，英文名： AFP-L3

小鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA檢測試劑盒Mouseadrenomedullin,ADMELISAKit 50T

人花生四烯酸(AA)免疫試劑盒 Human Arachidonic Acid,AA

RatCrosslaps,CrELISAKit大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)PCR檢測試劑盒

200微升1厘米光徑石英比色皿1個

MouseCyclin-D1PCR檢測試劑盒小鼠細胞周期素D1(Cyclin-D1
實時熒光定量PCR：
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限，實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據(jù)標準曲線獲得定量結(jié)果。因此，實時熒光定量PCR無需內(nèi)標是建立在兩個基礎(chǔ)之上的：
1）Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時，剛剛進入真正的指數(shù)擴增期（對數(shù)期），此時微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現(xiàn)性，即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系，可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定，因此，實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內(nèi)標法是一種準確的、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確，重現(xiàn)性定量方法，已得到，廣泛用于基因表達研究、轉(zhuǎn)基因研究，藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。
定量PCR方法：
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增（其中一個引物為熒光標記）。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物，競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開，分別測定熒光強度，根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標和引物，內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記，下游引物不標記。在模板擴增的同時，內(nèi)標也被擴增。在PCR產(chǎn)物中，由于內(nèi)標與靶模板的長度不同，二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來，分別測定其熒光強度，以內(nèi)標為對照定量待檢測模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛等標記引物，擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結(jié)合，再加入抗di高辛酶標抗體－辣根過氧化物酶結(jié)合物，最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實驗，若加入內(nèi)標，作出標準曲線，也可實現(xiàn)定量檢測目的。
下列是公司正在銷售的產(chǎn)品：
大鼠前列腺素E合酶2(PTGES2)ELISA試劑盒 ，英文名： PTGES2 ELISA Kit

Mouse angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 小鼠血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA試劑盒

Ratheatshockprotein20,hSP-20ELISAKit 大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGR-Beta(Humanglucocoicoidreceptor-Beta)ELISAKit人糖皮質(zhì)激素受體β規(guī)格：48T/96T

細胞單胺氧化酶B型(MAO-B)活性比色法定量檢測試劑盒20次

RatansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白(FPN)ELISA試劑盒 ，英文名： FPN ELISA Kit

人中性粒細胞堿性0酸酶(NAP)ELISA檢測試劑盒Humanneuophilicalkalinephosphatase,NAPELISAKit 96T/48T

大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)免疫試劑盒 Rat Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP-3 ELISA kit

英文名稱Human25(OH)D3ELISAKit人25羥D3(25(OH)D3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

糞便副傷B(SalmonellaParatyphiB)定量PCR擴增檢測試劑盒20次

ELISAKitTSGF人特異生長因子/相關(guān)因子規(guī)格：48T/96T
豬附紅細胞體(SEP)核酸檢測試劑盒Anti-phospho-STAT5a(pThr694)/FITC 熒光素標記抗0酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse Anti-rabbit IgG 小鼠抗兔IgG (親和層析化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg

谷半胱γ合成酶抗體 Anti-GCS 0.1ml

Donkey Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的驢抗兔IgG 0.1ml

FKBP10 英文名稱： 肽基脯酰順反異構(gòu)酶FKBP10抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Smad3(Ser213) 0酸化細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 規(guī)格 0.1ml

Mouse Anti-rabbit IgG 小鼠抗兔IgG (親和層析化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。產(chǎn)品僅用于科研實驗
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。