大鼠骨骼肌衛星原代細胞

培養信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3-5代左右；3代以內狀態最佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠骨骼肌衛星細胞分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的一種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態、結構和功能的器官，有豐富的血管、淋巴分布，在軀體神經支配下收縮或舒張，進行隨意運動。肌肉可根據共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方。肌細胞內有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）。明帶染色較淺，而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間，有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區段，叫做一個肌節。肌衛星細胞指骨骼肌中除骨骼肌纖維（肌細胞）外的一種扁平、有突起的細胞。著于肌纖維（肌細胞）表面；當肌纖維（肌細胞）受損后，肌衛星細胞可增殖分化，參與肌纖維（肌細胞）的修復，因此具有干細胞性質。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠骨骼肌衛星細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結合多次差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠骨骼肌衛星細胞經Desmin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

A-375[A375]細胞，惡性黑色素瘤細胞 白血病細胞,Jurk. Clone E6-1細胞 人皮膚鱗癌細胞;A-431 [A431]  MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細胞前體細胞)     SW-13細胞，腎上腺皮質腺癌細胞 黑色素瘤,Bowes Melanoma細胞 豬原代乳腺上皮細胞 小鼠原代頜下腺上皮細胞

Nrf2 peptide 核因子2相關因子2抗原 0.5mgNrf2 peptide 核因子2相關因子2抗原

ALB Protein Human 重組 Human Serum Albumin / HSA / ALB 蛋白

ACVR1重組狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白  Protein

COLEC10 Protein Mouse 重組小鼠 COLEC10 蛋白

CD40LG重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (His 標簽) Protein

小鼠脫氫表雄酮酯(DHEA-S)ELISA 試劑盒

One Japanese encephalitis aibody IgG (JE IgG) ELISA Kit 人流行性乙型腦抗體IgG(JE IgG)試劑盒

HumanBcellreceptor,BCRELISAKit 人B細胞受體(BCR)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenNuclearfactor-kappaB,NF-κB試劑盒雞核因子κB(NF-κB)試劑盒規格：96T/48T

載玻片細胞P38蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

mousefollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit小鼠促卵泡素(FSH)試劑盒規格：96T/48T

腮腺病毒(MuV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

麻風桿菌(ML)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

普氏立克次體(RP)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

莫氏立克次體(RM)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

大鼠骨骼肌衛星原代細胞小鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat peroxisome proliferator activated receptor alpha (PPAR- alpha) ELISA Kit 大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)試劑盒

Humanserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit 人絲/蘇蛋酸酶(STK)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenParathyroidhormone,PTH試劑盒雞甲狀旁腺激素(PTH)試劑盒規格：96T/48T

載玻片細胞PAR-1蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseFolicacid,FAELISAKit小鼠(FA)試劑盒規格：96T/48T

CD79B重組大鼠 CD79B / B29 蛋白 Protein

FGF1 (aFGF 0.5mgFGF1 (aFGF )(ECGF-beta)(HBGF-1) 肝素結合生長因子( 酸性成纖維細胞生長因子)(多肽片斷抗原)

CCL17重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 Protein

IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白

EFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)