大鼠小腦顆粒原代細胞

培養信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 神經元細胞樣

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠小腦顆粒細胞分離自小腦皮層組織；神經元是神經系統基本的結構與功能單位，小腦顆粒神經元是體積較小的神經元，直徑約10μm，在中樞神經系統中含量非常豐富，近乎神經元數量的一半。由于小腦神經元的生長、分化和大腦皮層神經元相似，而且數量多、便于取材，因此小腦顆粒神經元是研究神經元生長發育、神經軸突再生及神經疾病發生機制和臨床神經藥理的重要手段。小腦顆粒神經元是小腦主要的中間神經元，在哺乳動物的小腦內數量為豐富。顆粒神經元的軸突與苔狀纖維和爬行纖維相聯系，形成小腦皮層內的神經元環路，在小腦的神經活動中起著非常重要的作用。在動物傳染性海綿狀腦病中，病變可波及小腦顆粒神經元，導致小腦皮層的神經元環路受損，從而呈現神經性行為失調。研究小腦顆粒神經元在動物傳染性海綿狀腦病病理學變化中的反應、病理發生的機理特別是分子機理，有賴于小腦顆粒神經元細胞模型的建立。小腦顆粒細胞的軸突是沿冠狀軸分布的平行纖維，正是這種排列保證了興奮的單向傳導，這是小腦功能理論中的關鍵假設，小腦顆粒細胞通過g-氨基丁酸接受戈爾吉細胞的抑制性突觸的信息傳入。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠小腦顆粒細胞采用蛋白酶消化法結合神經元專用培養基、化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠小腦顆粒細胞經NSE免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

C6/36 白紋伊蚊細胞  大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12] T淋巴細胞白血病細胞，HuT78細胞 Mv.1.Lu(NBL-7)細胞，貂肺上皮細胞  RPS6KB1 Others Human 人 PS6K / RPS6KB1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 小鼠原代子宮微血管內皮細胞 人原代脈絡膜微血管內皮細胞

ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.5mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(18-39) 促腎上腺皮質激素(18-39)(抗原)

IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

BID重組小鼠 BID 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

IL2RG Protein Rat 重組大鼠 IL2RG / CD132 蛋白

CABP5重組人 CABP3 / CABP5 蛋白 Protein

小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA 試劑盒

Human vitamin D2 (VD2) ELISA Kit 人2(VD2)試劑盒

HumanpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit 人相關血漿蛋白A(PAPP-A)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanchlamydialprotease-likeactivityfactor,CPAF試劑盒人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)試劑盒規格：96T/48T

桌面DNA清除溶液500毫升

Humansecretorycompone,SCELISAKit人分泌成分(SC)試劑盒規格：96T/48T

人組織多肽抗原(TPA)試劑盒   96T/48T

人組織蛋白去乙酰化酶(HD)試劑盒   96T/48T

人組織蛋白酶抗體(CathAb)試劑盒   96T/48T

人組織蛋白酶S(cath-S)試劑盒   96T/48T

大鼠小腦顆粒原代細胞豚鼠基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human iercellular adhesion molecule 2 (ICAM-2/CD102) ELISA Kit 人細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒

HumanHerpesGestation,HGELISAKit 人皰疹抗體(HG)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCXC-chemokinereceptor3,CXCR3試劑盒人CXC趨化因子受體3(CXCR3)試劑盒規格：96T/48T

組織FAK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanprocollagenⅠN-terminalpeptide，PⅠNPELISAKit人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)試劑盒規格：96T/48T

IL8重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77, Fc 標簽) Protein

Ⅹ(F10)重組蛋白 Recombinant Coagulation Factor X (F10)

EFNA4重組人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白  Protein

ALOX5AP Protein Human 重組人 ALOX5AP / FLAP 蛋白 (His 標簽)

HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。