大鼠心臟干原代細胞

培養信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 長梭形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠心臟干細胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以氧和各種營養物質，并帶走代謝的終產物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能。研究發現，心臟干細胞是一種多潛能細胞，具有再生和克隆能力，并可分化為心肌細胞、平滑肌細胞和血管內皮細胞。體內研究顯示，從心臟中分離出的心臟干細胞，經體外簡單培養、增殖和標記后，移植到心肌梗死邊緣區域，心梗血流動力學和心室壁厚度較對照組明顯改善，心肌梗死邊緣區域發現有標記的心肌細胞、平滑肌細胞和內皮細胞。盡管其新生心肌細胞較小，但表達一些特殊肌蛋白如心臟肌球蛋白重鏈、α-肌動蛋白、α-輔肌動蛋白、連接蛋白等，證實了心臟干細胞對心肌梗死的修復作用。干細胞移植治療是目前心肌梗死和缺血性心臟病細胞重建的主要方法，成體干細胞中的c-kit陽性心臟干細胞因其來源于心臟，有定向心臟細胞系分化的趨勢，體內外可以分化成心肌細胞、血管內皮細胞和平滑肌細胞，同時自體移植不存在免疫排斥反應及倫理問題已經成為目前研究的熱點。短期內獲得治療量的自體心臟干細胞是這一治療應用于臨床的關鍵所在。因此，研究一種新的分離培養方法可在短時期內獲得大量純度較高的自體c-kit陽性心臟干細胞成為目前干細胞領域研究的熱點問題之一。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠心臟干細胞采用機械剪碎組織、膠原酶分次消化法結合差速貼壁、心臟干細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠心臟干細胞經c-kit免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

C7 Others Human 人 C7 / Compleme compone 7 人細胞裂解液   ES-2(人卵巢透明細胞癌細胞)  CL-0263BGC-803(人胃癌細胞) 貓腎細胞;F81  CL-0065CoC1/DDP(人卵巢耐藥細胞亞株) 小鼠原代子宮內膜上皮細胞 小鼠原代海馬神經元細胞

BCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein 0.5mgBCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein) 癌耐藥相關蛋白(抗原)

IL1RL1 Protein Human 重組人 IL1RL1 / ST2 蛋白 (isoform a, His 標簽)

MDGA2重組小鼠 MDGA2 / MAMDC1 蛋白 Protein

CD40LG Protein Rat 重組大鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)

LRP10重組人 LRP10 蛋白 Protein

小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA 試劑盒

Human vitamin D receptor (VD R) ELISA Kit 人受體(VD R)試劑盒

Humanai-zonapellucidaaibody,aZPELISAKit 人抗透明帶抗體(aZP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancholesterol,CH試劑盒人(CH)試劑盒規格：96T/48T

紫外線處理DNA損傷彗星熒光試劑盒20次

HumansecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit人分泌型0脂酶A2(sPLA2)試劑盒規格：96T/48T

人組織型纖溶酶原激活因子(tPA)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human tPA (Plasminogen Activator, Tissue) ELISA Kit

人纖溶抑制因子(TAFI)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human TAFI (Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor) ELISA Kit

人纖維蛋白(FBL)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human FBL (Fibrillarin) ELISA Kit

人生長激素受體(GHR)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human GHR (Growth Hormone Receptor) ELISA Kit

大鼠心臟干原代細胞植物D(VD)ELISA 試劑盒

Human ai Golgi aibody (AGAA) ELISA Kit 人抗高爾基體抗體(AGAA)試劑盒

PorcineLeptin,LEPELISAKit 豬瘦素(LEP)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAFP(HumanAlpha-fetoprotein)ELISAKit人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白

血液血管緊張素Ⅰ轉化酶(ACE)總活性比色法定量試劑盒20次

Mousethrombieceptor,ELISAKit小鼠受體()試劑盒

EPOR重組人 EPOR / Erythropoietin Receptor 蛋白  Protein

軟骨寡聚基質蛋白(COMP)重組蛋白 Recombinant Cartilage Oligomeric Matrix Protein (COMP)

PRNP重組人 PRNP / Prion 蛋白  Protein

AACS Protein Human 重組人 AACS / Acetoacetyl-CoA Synthetase 蛋白 (His 標簽)

HA Protein Influenza B 重組乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 蛋白