人膀胱移行上皮原代細胞

培養信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

人膀胱上皮細胞分離自膀胱組織；膀胱是一個儲尿器官，在哺乳類動物，它是由平滑肌組成的一個囊形結構，位于骨盆內，其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌，可以控制尿液的排出。膀胱壁由三層組織組成，由內向外為黏膜層、肌層和外膜。肌層由平滑肌纖維構成，稱為逼尿肌，逼尿肌收縮，可使膀胱內壓升高，壓迫尿液由尿道排出。在膀胱與尿道交界處有較厚的環形肌，形成尿道內括約肌。在括約肌收縮能關閉尿道內口，防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分為三層：即漿膜層（蜂窩脂肪組織）、肌肉層（逼尿肌、膀胱三角區肌）和黏膜層（極薄的一層移行上皮組織）。其主要作用有：①組成過濾屏障內壁的重要部分；②在炎癥和致血栓物質的刺激合成必要的生物活性分子；③受損后影響系膜細胞和上皮細胞，進而影響腎臟病變。

方法簡介：

公司實驗室分離的人膀胱移行上皮細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的人膀胱移行上皮細胞經Cytokeratin-AE1/AE3免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

CL-0333E.G7-OVA(小鼠T淋巴瘤細胞)  Ana-1(小鼠巨噬細胞)     VEGFAA Others Danio rerio (zebrafish) 斑馬魚 VEGF165 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   EDAR Others Cynomolgus 食蟹猴 EDAR 小鼠原代胃平滑肌細胞 兔原代海馬神經干細胞

DAPK1(Death associated protein kinase 1 0.5mgDAPK1(Death associated protein kinase 1) 凋亡相關蛋白激酶1抗原

INSR Protein Human 重組人 Insulin Receptor / INSR / CD220 蛋白 (His & GST 標簽)

LAG3重組大鼠 LAG3 / CD223 / Lymphocyte activation gene 3 蛋白 Protein

BMPR1A Protein Mouse 重組小鼠 ALK-3 / BMPR1A 蛋白

STAT1重組人 STAT1 / p91 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

兔兒茶酚胺(CA)ELISA 試劑盒

Human ypsinogen activation peptide (TAP) ELISA Kit 人原激活肽(TAP)試劑盒

Humanmorbillivirus,MVELISAKit 人麻疹病毒(MV)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanglathione,GSH試劑盒人(GSH)試劑盒規格：96T/48T

組織單胺氧化酶B型(MAO-B)活性熒光定量試劑盒20次

Humanmorbillivirus,MVELISAKit人麻疹病毒(MV)試劑盒規格：96T/48T

豬Ⅰ型前膠原羧基端肽試劑盒   豬Ⅰ型前膠原羧基端肽試劑盒   規格型號：96T/48T   豬Ⅰ型前膠原羧基端肽試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：豬Ⅰ型前膠原羧基端肽試劑盒、豬Ⅰ型前膠原羧基端肽試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

植物D2試劑盒   植物D2試劑盒   規格型號：96T/48T   植物D2試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：植物D2試劑盒、植物D2 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

人Dickkopf1試劑盒   人Dickkopf 1試劑盒   規格型號：96T/48T   人Dickkopf 1試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：人Dickkopf 1試劑盒、人Dickkopf 1 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

人CD14分子試劑盒   人CD14分子試劑盒   規格型號：96T/48T   人CD14分子試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：人CD14分子試劑盒、人CD14分子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

人膀胱移行上皮原代細胞豬(Dex)ELISA 試劑盒

Human arginase (Arg) ELISA Kit 人精酶(Arg)試劑盒

PorcineangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit 豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAlpha2-AP(RabbitAlpha2-Aiplasmin)ELISAKit兔子α2抗纖溶酶

血液亮(leucine含量高效液相色譜法定量試劑盒20次

Mouseβ-hexosaminidaseA,β-HexAELISAKit小鼠β氨基己糖苷酶A(β-HexA)試劑盒

CHEK1重組小鼠 CHK1 / CHEK1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

鈣/鈣調蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱγ(CAMK2γ)重組蛋白 Recombinant Calcium/Calmodulin Dependent Protein Kinase II Gamma (CAMK2g)

BCL2L12重組人 BCL2L12 / BCL2-like 12 蛋白 (GST 標簽) Protein

IRAK4 Protein Human 重組人 IRAK4 / IRAK-4 蛋白

CXCL12 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (Fc 標簽)

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。