人皮層神經元原代細胞

培養信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 神經元細胞樣

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

人皮層神經元細胞分離自腦皮層組織；皮層神經元細胞是構成中樞神經系統結構和功能的基本單位。神經元是具有長突觸(軸突)的細胞，它由細胞體和細胞突起構成。在長的軸突上套有一層鞘，組成神經纖維，它的末端的細小分支叫做神經末梢。細胞體位于腦、脊髓和神經節中，細胞突起可延伸至全身各器官和組織中。細胞體是細胞含核的部分，其形狀大小有很大差別，直徑約4-120微米。核大而圓，位于細胞中央，染色質少，核仁明顯。細胞質內有斑塊狀的核外染色質，還有許多神經元纖維。細胞突起是由細胞體延伸出來的細長部分，又可分為樹突和軸突。每個神經元可以有一或多個樹突，可以接受刺激并將興奮傳入細胞體。每個神經元只有一個軸突，可以把興奮從胞體傳送到另一個神經元或其他組織，如肌肉或腺體。皮質神經元是大腦皮質的主要組成細胞之一，是大腦進行功能活動調節的基本單位，參與動物多種中樞神經系統疾病的病理過程。通過形態學觀察顯示神經元從貼壁、伸出突起開始；突起逐漸增多，而后突起進一步增多并逐漸成網，同時細胞胞體增大，周邊光暈明顯。10-12d細胞為豐滿，隨后神經元開始裂解，突起逐漸減少，細胞已退化變性，輪廓模糊，光暈消失，細胞變形。

方法簡介：

公司實驗室分離的人皮層神經元細胞采用蛋白酶消化法、神經元專用培養基培養篩選結合化學試劑抑制法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的人皮層神經元細胞經β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

CL-0337FO(小鼠骨髓瘤細胞)  EPOR Others Mouse 小鼠 EPOR 人細胞裂解液   LX-2, 人肝星形細胞株 小鼠垂體瘤細胞(分泌促生長激素分泌激素)，GT1.1細胞 OK(負鼠(opossum)腎細胞)  膽道癌組織源性原代細胞 小鼠原代胃黏膜上皮細胞 大鼠原代腦動脈平滑肌細胞

HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P 0.5mgHHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人類皰疹病毒8抗原

IP6K1 Protein Human 重組人 IHPK1 蛋白 (His & GST 標簽)

FCAR重組大鼠 CD89 / FCAR 蛋白 Protein

CA8 Protein Mouse 重組小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 蛋白

EPOR重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 Protein

兔超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA 試劑盒

Rat alcohol dehydrogenase (ADH) ELISA Kit 大鼠乙醇脫氫酶(ADH)試劑盒

Huma-lymphoopicvirusⅠ,HTLV-ⅠELISAKit 人類嗜T淋巴細胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)試劑盒 進口分裝

HumanGlycatedAlbumin,GA試劑盒人糖化白蛋白(GA)試劑盒

組織蛋酸酶1(PP1)活性比色法定量試劑盒20次

Humanmonocyteierferongammainducingfactor,MIGFELISAKit人γ干擾素誘導單核細胞因子(MIGF/CXCL9)試劑盒

豬(HYD)ELISAKit   ELISA. 

豬(NO)ELISAKit   ELISA. 

豬內皮型合成酶(eNOS)ELISAKit   ELISA. 

豬內皮型合成酶3(eNOS-3)ELISAKit   ELISA.

人皮層神經元原代細胞豬凋亡相關因子(FAS/CD95)ELISA 試劑盒

Human arginine vasopressin (AVP) ELISA Kit 人精加壓素(AVP)試劑盒

PorcineB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit 豬B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAlpha2-AP(HumanAlpha2-Aiplasmin)ELISAKit人α2抗纖溶酶

血液亮(leucine)含量比色法定量試劑盒20次

Mouseβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISAKit小鼠β內酰胺酶抑制劑(BLI)試劑盒

IgG1重組小鼠 IgG1-Fc 蛋白 (102 Cys/Ser) Protein

CK17(Cytokeratin 17 0.5mgCK17(Cytokeratin 17) 細胞角蛋白17抗原

SERPINB4重組人 SerpinB4 蛋白 Protein

CDKN2D Protein Human 重組人 CDKN2D / p19ink4d 蛋白 (GST 標簽)

FGF1 Protein Mouse 重組小鼠 / 大鼠 aFGF / FGF1 蛋白