質量控制:用于食品、藥品、環境等領域中與艱難梭菌相關檢測的質量控制。可對檢測方法、培養基、試劑等進行質量評估和驗證,如驗證培養基對艱難梭菌的生長支持能力、選擇性和特異性等。
方法驗證:在相關標準方法的驗證中,作為標準菌株確認檢測方法的準確性和可靠性,包括增菌、分離、鑒定等環節能否有效檢出艱難梭菌。
實驗室能力評估:幫助實驗室評估自身的檢測能力和操作水平,定期使用該菌株進行實驗,可及時發現實驗過程中存在的問題,以保證微生物檢測結果的質量。
形態特征:革蘭氏陽性粗大桿菌,顯微鏡油鏡下可見紫色粗大桿菌,大小不一,可見卵圓形透亮芽孢,甚至可見鞭毛可位于菌體遠端至尾端5。
培養特性:為嚴格厭氧菌,培養時需要創造嚴格的無氧環境,常用的培養基包括環絲氨suan - 頭孢西ding - 果糖瓊脂(CCFA)等。其培養過程相對較慢,通常需要 2-3 天甚至更長時間才能觀察到明顯的菌落生長,菌落通常較大、白色或淡黃色、邊緣不整齊,可能會產生一種類似于腐敗的氣味。
其他特性:艱難梭菌芽孢抵抗力十分強大,在體外有氧環境中仍可存活數周 - 數月,耐熱,在 100℃的溫度下需要 1 小時才能死亡,不耐干燥,不耐強酸強堿,對抗菌藥物高度耐藥,對乙醇敏感,醫院中許多消毒劑均能將其殺死。
通常采用西林瓶包裝,內裝凍干粉。常見規格可能為 1 支 / 盒等,具體會因產品批次和銷售形式有所不同。
西林瓶請置于 - 20℃保存,避免反復凍融,以保持菌株的活性14。若為短期保存,也可在 2-8℃下存放14。
復蘇:復蘇前應準備適于該菌種生長的培養基和培養設備,所有操作均應在符合生物安全保護及無菌條件下進行。啟開前,用 75% 酒精棉消毒西林瓶表面。在無菌條件下,打開西林瓶膠塞,加入復蘇液,將凍干菌種制成懸浮液,然后用無菌滴管或移液器吸取適量,移至非選擇性固體培養基平板或液體培養基上,按推薦的培養條件進行培養和傳代保存。
培養和傳代:艱難梭菌質控菌種購買后應在保質期內使用,復蘇后的菌種一般宜傳代 2-3 次后使用,菌種傳代 5 次后建議棄置。培養時需按照推薦的培養條件進行,一般為 36℃±1℃,在厭氧環境下培養 48-72 小時。