質(zhì)量控制:用于食品、藥品、環(huán)境等領(lǐng)域中與生孢梭菌相關(guān)檢測(cè)的質(zhì)量控制。可對(duì)檢測(cè)方法、培養(yǎng)基、試劑等進(jìn)行質(zhì)量評(píng)估和驗(yàn)證,如驗(yàn)證培養(yǎng)基對(duì)生孢梭菌的生長(zhǎng)支持能力、選擇性和特異性等。
方法驗(yàn)證:在相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)方法的驗(yàn)證中,作為標(biāo)準(zhǔn)菌株確認(rèn)檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性和可靠性,包括增菌、分離、鑒定等環(huán)節(jié)能否有效檢出生孢梭菌。
實(shí)驗(yàn)室能力評(píng)估:幫助實(shí)驗(yàn)室評(píng)估自身的檢測(cè)能力和操作水平,定期使用該菌株進(jìn)行實(shí)驗(yàn),可及時(shí)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)過程中存在的問題,以保證微生物檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量。
形態(tài)特征:革蘭氏陽性粗大桿菌,芽孢呈橢圓形,位于菌體中央或次極duan,直徑小于菌體寬度,使菌體呈梭狀。
培養(yǎng)特性:嚴(yán)格厭氧,在厭氧條件下生長(zhǎng)良好。可在多種培養(yǎng)基上生長(zhǎng),如庖肉培養(yǎng)基、硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基等。在庖肉培養(yǎng)基中培養(yǎng)時(shí),肉渣被消化,產(chǎn)生硫化氫,使培養(yǎng)基變黑,有腐敗性惡臭。
通常采用西林瓶包裝,內(nèi)裝凍干粉。常見規(guī)格可能為 1 支 / 盒等,具體會(huì)因產(chǎn)品批次和銷售形式有所不同。
西林瓶應(yīng)置于 - 20℃保存,避免反復(fù)凍融,以保持菌株的活性。若為短期保存,也可在 2 - 8℃下存放。
復(fù)蘇:復(fù)蘇前應(yīng)準(zhǔn)備適于該菌種生長(zhǎng)的培養(yǎng)基和培養(yǎng)設(shè)備,所有操作均應(yīng)在符合生物安全保護(hù)及無菌條件下進(jìn)行。啟開前,用 75% 酒精棉消毒西林瓶表面。在無菌條件下,打開西林瓶膠塞,加入復(fù)蘇液,將凍干菌種制成懸浮液,然后用無菌滴管或移液器吸取適量,移至非選擇性固體培養(yǎng)基平板或液體培養(yǎng)基上,按推薦的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)和傳代保存。
培養(yǎng)和傳代:生孢梭菌質(zhì)控菌種購(gòu)買后應(yīng)在保質(zhì)期內(nèi)使用,復(fù)蘇后的菌種一般宜傳代 2 - 3 次后使用,菌種傳代 5 次后建議棄置。培養(yǎng)時(shí)需按照推薦的培養(yǎng)條件進(jìn)行,一般為 36℃±1℃,在厭氧環(huán)境下培養(yǎng) 48 - 72 小時(shí)。