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苯胺4羥化酶(AH)可見分光光度法

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更新時間:2022-03-10 16:41:50瀏覽次數:196

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 50管/24樣
貨號 YS-01S6854 應用領域 化工
主要用途 公司產品僅供于科研使用    
苯胺4羥化酶(AH)可見分光光度法公司正在熱銷的產品:TAT大鼠凝血酶抗凝血酶復合物ELISA檢測試劑盒
TAT-III大鼠凝血酶抗凝血酶Ⅲ復合物ELISA方法
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TFF-3大鼠尿液三葉因子3ELISA檢測試劑盒

詳細介紹

圖片1.png

商品屬性:

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

苯胺4羥化酶(AH)可見分光光度法

50管/24樣

可見分光光度法

YS-01S6854

商品介紹:

公司產品僅用于科研測定意義
細胞色素P450酶是一組主要存在于肝臟的同工酶,在外源物質代謝中具有重要作用,尤其是藥物和毒物的代謝。AH在P450酶系中相當于CYP2E1亞型,CYP2E1不僅參與了藥物的代謝,而且還能催化多種前致癌物和前毒物的活化過程。

測定原理:

AH催化苯胺羥化后產生的4-氨基酚,進一步轉變為酚-吲哚復合物,在630nm處有特征吸收峰;通過測定630nm吸光度增加速率,來計算AH活性。

自備儀器及用品:

普通離心機、超速離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、雙蒸水和冰。

試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃避光保存。

試劑三:液體×1瓶,4℃避光保存。

試劑四:液體×1瓶,4℃避光保存,未變成藍綠色之前均可使用。

標準品:液體×1支(EP管中),2 μmol/mL酚標準液,4℃保存。

粗酶液提?。?/span>

1. 組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿,4℃、8000g離心10min,取上清液待測。

2. 細菌或細胞:按照細菌或細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

3. 血液可直接測定,或者適當稀釋后測定。

測定步驟:

1. 分光光度計/酶標儀預熱30min,調節波長到510 nm,蒸餾水調零。

2. 試劑三置于37℃水浴中預熱30 min。

3. 空白管:取EP管,加入4μL蒸餾水,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A空白管。

4. 標準管:取EP管,加入4μL標準品,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A標準管。

5. 對照管:取EP管,加入4μL上清液,40μL蒸餾水,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A測定管。

6. 測定管:取EP管,加入4μL上清液,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A測定管。

其中標準管和空白管只需做一管,測定管和對照管每個樣均需做。

注意:空白管和標準管只需測定一次。

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