詳細介紹
基本信息:
產品名稱:血糖可見分光光度法
測試方法:可見分光光度法
規格 : 50管/48樣
貨號:YS-01S6788
測定意義
哺乳動物血液中的葡萄糖稱為血糖,是其體內糖的主要運輸形式。血糖濃度受神經系統和激素的調節而保持相對穩定,調節失衡時出現高血糖和低血糖。糖尿病、顱內壓增加和脫水癥等均可引起高血糖;飯后,精神緊張也可出現生理性高血糖。相反,胰島β細胞增生或腫癌等,垂體、腎上腺皮質和甲狀腺功能減退,以及嚴重肝病患者均可出現低血糖癥狀。此外,饑餓和劇烈運動可引起暫時的低血糖。
測定原理:
葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并產生過氧化氫;過氧化物酶催化過氧化氫氧化4-氨基安替比林偶聯酚,生成有色化合物,在505nm有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板和蒸餾水。
用途范圍:僅供科研研究實驗
需自配儀器:
1、酶標儀(比色測定波長為450nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、微量移液器
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
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