詳細介紹
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
1000 mL | FS-P013329 |
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取, 多出的一個是PC(樣品制備陽性對照), 一個是NC(樣品制備陰性對照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒。 | 三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行) 10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數量相應增加2或3倍。 11. 產品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建
MARCKS /FITC 熒光標記丙蛋白激C底物Marcks抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Tetracycline/FITC 熒光標記四環抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADAMTS13 整合樣金屬蛋白與13型抗體 0.2ml
Rabbit chicken IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗雞IgM 0.1ml
GPX3 谷胱甘肽過氧化3 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bovine IgM/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗IgM 0.1ml
Tetracycline/FITC 熒光標記四環抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
IL-1(Human Interleukin 1) ELISA Kit 人白介1Multi-class antibodies: 48T
CXCL15/Lungkine 趨化因子CXCL15抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Guinea pig IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
Park2(Human Parkinson disease 2 parkin) ELISA Kit 人帕金森氏病2Parkin 96T
Raptor mTOR相關調控蛋白抗體 0.1ml
phospho-c-Jun(Thr239) 磷化原癌基因c-Jun抗體 0.1ml
CXCL15/Lungkine 趨化因子CXCL15抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit mouse IgG-Fc/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
GNPTG 溶體累積病相關蛋白/口吃相關蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AMN1 細胞核重定位及紡錘體檢查點蛋白AMN1抗體 0.2ml
phospho-JAK2(Tyr221) /FITC 熒光標記磷化蛋白酪激JAK-2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit horse IgG/Cy3 Cy3標記的兔抗馬IgG 0.1ml
SHP-1/FITC 熒光標記造血細胞磷抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
超快核酸銀染試劑盒人端粒重復結合因子1(TERF1)elisa檢測試劑盒
人胞漿磷蛋白1(STMN1)elisa檢測試劑盒
人微量轉鐵蛋白(MTF)elisa檢測試劑盒
人角蛋白20(CK20/KRT20)elisa檢測試劑盒
人胸腺白血病抗原(TLA)elisa檢測試劑盒
人神經降壓(NT)elisa檢測試劑盒
人己糖2(HK2)elisa檢測試劑盒
人嗜性白血球相關之RNA解酵家族成員3(EAR3)elisa檢測試劑盒
人死亡相關蛋白6(DAP6)elisa檢測試劑盒
人纖溶原(Plg)elisa檢測試劑盒
人胸腺五肽(TP5)elisa檢測試劑盒
人視黃誘導基因/RIG-1樣受體(RLR)elisa檢測試劑盒
人補體因子H相關蛋白3(CFHR3)elisa檢測試劑盒
人胃動蛋白1(GKN1)elisa檢測試劑盒
人胸腺嘧啶核苷磷化(TP)elisa檢測試劑盒
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。