詳細介紹
參數規格:
產品貨號:FS-P013600
產品規格:50次
產品分類:純化試劑盒
產品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區,并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
Human dermato-pontin,DPT ELISA Kit 人皮膚蛋白Multi-class antibodies: 48T
SLC6A19 鉀依賴鈉鈣交換蛋白6Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat rat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的羊抗大鼠IgG 0.1ml
Bid(Human BH3 interacting domain death agonist) ELISA Kit 人BH3結構域凋亡誘導蛋白 96T
NMT2 肉豆蔻酰基轉移2-N端肽抗體 0.2ml
Beclin 1 Bcl-2同源結構域蛋白抗體 0.1ml
SLC6A19 鉀依賴鈉鈣交換蛋白6Multi-class antibodies: 0.2ml
CD14/RBITC 紅色羅丹明標記CD14蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
CRLR/CALCRL(calcitonin receptor like precursor) 降鈣受體樣蛋白抗原Multi-class antibodies: 0.5mg
F-肌動蛋白抗體 F-Actin 0.1ml
SLC27A1 長鏈脂肪轉運蛋白1抗體 0.2ml
Prickle 刺痛感蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-FGFR1 (Tyr766) 磷化性成纖維細胞生長因子受體1抗體 0.1ml
CRLR/CALCRL(calcitonin receptor like precursor) 降鈣受體樣蛋白抗原Multi-class antibodies: 0.5mg
Mouse human IgG(3D3)/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.1ml
GYG2 糖原蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ATAD3A/B/C 三磷腺苷家族蛋白3A抗體 0.2ml
PSGD/HOXB13/FITC 熒光標記同源盒蛋白HOXB13抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG-Fc/Bio 生物標記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
phospho-c-Jun/AP-1(pThr91/pThr93)/FITC 熒光標記抗磷化原癌基因c-Jun抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
豬瘟病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒50次熱帶假絲酵母種屬: Candida│tropicalis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 13生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
阿爾萊特葡萄球菌種屬: Staphylococcus│arlettae分離基物: 腐稈劑提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 腐化植物稈培養基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;礦物油法
諾爾斯鏈霉菌種屬: Streptomyces│noursei提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 代謝產物具有弱的抗活性。培養基: 0027生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法
變形桿菌種屬: Proteus│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領域: Kauffmann血清型 9a 1ace培養基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
腫瘤壞死因子配體超家族成員9(TNFSF9)ELISA試劑盒液體石蠟 色譜固定液,80℃對 98%甲基紅鈉鹽(ACS reagent,95 %)
腫瘤壞死因子配體超家族成員7(TNFSF7)ELISA試劑盒液體石蠟 USP級3-甲 98%間甲基紅
腫瘤壞死因子配體超家族成員4(TNFSF4)ELISA試劑盒液體石蠟 分子生物學級 99%紫脲銨(IND)
腫瘤壞死因子配體超家族成員14(TNFSF14)ELISA試劑盒液體石蠟 包埋級鄰甲 98%紫脲銨(ACS)
腫瘤壞死因子配體超家族成員13(TNFSF13)ELISA試劑盒液體石蠟 輕質、密度:0.84-0.86對甲 98%甲基紫,龍膽紫
腫瘤壞死因子配體超家族成員12(TNFSF12)ELISA試劑盒液體石蠟 重質、密度:0.86-0.894- 98%間酚
腫瘤壞死因子α誘導蛋白2(TNFαIP2)ELISA試劑盒硫軟骨A鈉鹽 85%4-甲 97%硝氮黃
腫瘤關聯糖蛋白72(TAG72)ELISA試劑盒肝鋰 ≥150 USP units/mg4-酚 98%中性紅
腫瘤蛋白p53結合蛋白1(TP53BP1)ELISA試劑盒肝鋰 ~200 units/mg4-乙 97%橙黃Ⅳ
中性鞘脂(NSMASE)ELISA試劑盒肝鈉 185 USP units/mg 對甲 98%橙黃Ⅰ
中性粒明膠關聯脂質運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒透明質鈉 95%,來源:雞冠2,4,6-三 98%鄰二酚紫
中性粒彈性蛋白(ELA2)ELISA試劑盒2-溴乙基乙酯 97%(甲氧基)三基化 98%N-基(釩試劑)
中心體肌動蛋白β(CTRN2)ELISA試劑盒2-溴乙 96%4-甲氧基乙炔 99%1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚(AR,≥98%)
中心體蛋白3(CETN3)ELISA試劑盒2-溴乙 分析標準品4-正戊基環己酮 98%1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚(AR,90.0%)
中心體蛋白2(CETN2)ELISA試劑盒1,4-環己二酮單乙二縮酮 98%4-正-丁基-4-基聯 98%藍VF
中心體蛋白1(CETN1)ELISA試劑盒氧溴化 98%4-正戊氧基乙酰 99%酚酞(IND)