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詳細介紹
產品屬于：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
PCNA cell proliferation Detection Kit | 20T | 1～3天 |
商品介紹：
| PCNA 細胞增殖檢測試劑盒（細胞免疫熒光法/流式細胞儀檢測），PCNA是細胞DNA 多聚酶的“δ"輔助蛋白，是真核細胞DNA 合成時所必需的一種酸性核蛋白。PCNA 在細胞核內合成，并儲存在核內，細胞處于靜止狀態時，其含量很低，當細胞進入增殖周期中，其表達明顯增加，故PCNA 的表達高低可反映細胞增殖的活躍程度。 |
操作方法
1. 在最適的環境下培養細胞。
2. 除去培養液，用PBS 洗一次。
3. 胰蛋白酶處理和收集細胞，離心，（注意1）保證每管細胞數在106 個。
4. 用0.3 ml PBS 輕輕的重懸細胞, 然后慢慢加入0.7 ml 預冷的100%乙醇。用1 ml 玻璃移液管小心的混勻。在4°C 至少1h。（注意2）
5. 沉淀細胞，*吸去上清。
6. 用150 μl PBS/1 % BSA 洗細胞2 次。
7. 用100μl 抗體孵育液（0.5% Tween-20/1%BSA/PBS）重懸細胞，加入1ul PCNA 抗體(1μg/106 cells)，室溫孵育1 小時。
8. 離心收集細胞，用150μl1% BSA-PBS 洗2 次。
9. 離心收集細胞，用50μl 抗體孵育液重懸，加1μl (1.5μg/106 cells) 羊抗鼠IgG-FITC，室溫孵育30 分鐘。離心收集細胞，150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次。
10. 用含有終濃度為10 μg/ml RNase A 和20μg/ml PI 的0.5 ml PBS（pH7.4）重懸細胞。
11. 避光使細胞在室溫下孵育20min 后，離心收集細胞，150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次后，轉移至流式檢測管中重懸。
12. FACS 檢測或者儲存于4℃。
培養操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
載脂蛋白C4(APOC4)elisa試劑盒英文名稱：APOC4 ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝500g
載脂蛋白C3(APOC3)elisa試劑盒英文名稱：APOC3 ELISA Kit磷化癌易感基因1抗體包裝1g
載脂蛋白C1(APOC1)elisa試劑盒英文名稱：APOC1 ELISA Kit芳香烴受體核轉錄蛋白樣1抗體包裝25g
載脂蛋白A4(APOA4)elisa試劑盒英文名稱：APOA4 ELISA Kit癌易感基因復合物亞基蛋白3抗體包裝5g
載脂蛋白A2(APOA2)elisa試劑盒英文名稱：APOA2 ELISA Kit腫瘤轉移抑制蛋白BAMBI抗體包裝1g
載脂蛋白A1(APOA1)elisa試劑盒英文名稱：APOA1 ELISA KitB淋巴淋巴瘤因子9抗體包裝5g
孕酮(Pg)elisa試劑盒英文名稱：Pg ELISA Kit膽綠素還原酶抗體包裝1g
原肌球調節蛋白3(TMOD3)elisa試劑盒英文名稱：TMOD3 ELISA KitBIVM蛋白抗體包裝25g
原鈣黏素15(PCDH15)elisa試劑盒英文名稱：PCDH15 ELISA Kit血型Lewis A抗原抗體包裝5g
誘導型一氧化氮合酶(NOS2)elisa試劑盒英文名稱：NOS2 ELISA Kit粘蛋白/巖藻糖基轉移酶3抗體包裝1g
硬脂酰去飽和酶(SCD)elisa試劑盒英文名稱：SCD ELISA KitBloom綜合征相關蛋白抗體包裝5g
硬骨素(SOST)elisa試劑盒英文名稱：SOST ELISA Kit骨形態發生蛋白8b抗體包裝100g
吲哚胺2,3-雙加氧酶2(IDO2)elisa試劑盒英文名稱：IDO2 ELISA Kit磷化非受體性蛋白酪激酶ETK抗體包裝1g
吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)elisa試劑盒英文名稱：IDO ELISA Kit磷化促凋亡調節蛋白BNIP3抗體包裝250mg
抑制素結合蛋白(INHBP)elisa試劑盒英文名稱：INHBP ELISA KitB淋巴特異性激活OCT結合蛋白1抗體包裝25g
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶樣3蛋白抗體白介素21(IL21)Alectinib (CH5424802; RO5424802; AF802) 是一種有效，選擇性和口服的 ALK 抑制劑，其 IC50 為 1.9 nM，Kd
PCNA細胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法)異煙
其他4-吡啶羧；吡啶-4-羧；4-吡啶羥；吡啶-4-羥；4-噼啉；4-吡啶甲；吡啶-4-甲；異尼克
英文名稱：COA
其他英文名稱：Isonicotinic acid；4-Pyridinecarboxylic acid；Pyridine-4-carboxylic acid
產品規格：CP，98%
包裝：100克
CAS號：55-22-1
C6H5NO2=123.11
級別：CP
含量：≥98.0%
熔點：≥310℃
氫氧化鈉溶解試驗：合格
鐵：≤0.004%
氮含量：5.7～6.0%
鈣含量：8.2～8.6%
重金屬：≤10 ppm
干燥失重：≤5.0%
性狀：針狀結晶或粉末。味稍甜而后微苦，有吸濕性，對光敏感。溶于水、甘油和堿溶液，微溶于乙和酮，不溶于。5％水溶液pH7.2～8.0，在無二氧化碳的水中為8.7。熔點 195～196℃(分解)
用途：生化研究。配制組織培養基。營養劑
保存：RT，避光
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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