hellobio：Streptavidin AF488 貨號：HB13531
| 生物學描述 | 鏈霉親和素AF488是與熒光染料AF488綴合的生物素結合蛋白，可用于檢測生物素標記的分子，如核酸、抗體和其他蛋白質。生物素化的抗體通過鏈霉親和素AF488以高的親和力結合，使得能夠在IHC、ICC、流式細胞術和蛋白質印跡中進行免疫熒光檢測。 關鍵特征: - 與AF488共軛(Ex:498納米，Em:525納米)
- 作為更穩定的凍干劑提供
- 用于重復成像的明亮且光穩定的信號
- 適用于IHC(IF)、ICC、蛋白質印跡和流式細胞儀
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| 描述 | AF488綴合鏈霉親和素，用于生物素偶聯蛋白和抗體的檢測和信號放大。 |
圖一。大鼠海馬內表達小清蛋白和鈣視網膜素的中間神經元。
大鼠海馬染色HB6457
檢測小清蛋白和HB6494
來檢測鈣視網膜素。使用抗小鼠生物素抗體(HB11345
隨后用鏈霉親和素AF488 (HB13531)孵育。方法:將大鼠腦解剖并在4% PFA中固定過夜，然后在30%蔗糖(在PBS中)中孵育直到下沉(大約。48小時)。在切片在1% NaBH4中孵育30分鐘之前，使用冷凍切片機切割40 μm水平切片。切片在0.05M甘氨酸、2% BSA和3%驢血清中封閉，然后在小清蛋白中孵育過夜HB6457(1:1000稀釋)和CalretininHB6494(1∶4000稀釋度)在4℃下。隨后用1∶300稀釋度的二抗山羊抗小鼠生物素抗體孵育2小時HB11345，山羊抗兔Janelia Fluor 549)。在PBST洗滌三次后，切片在室溫下用1.0 L/mL的鏈霉親和素AF488 (HB13531)孵育2小時。DAPIHB0747以1克/毫升的濃度使用以顯現細胞核。欲了解更多詳情，請參閱我們的IHC協議。使用徠卡DMI6000B倒置落射熒光顯微鏡捕獲圖像。使用z-stack中的20x物鏡以tilescan的形式拍攝圖像，曝光時間:A4: 57.803毫秒，GFP: 524.211毫秒，Y3: 524.211毫秒
圖二。海馬中表達小清蛋白的中間神經元和表達GFAP的星形膠質細胞。
大鼠海馬染色HB6457檢測小清蛋白和HB6406去探測GFAP。使用抗小鼠生物素抗體(HB11345隨后用鏈霉親和素AF488 (HB13531)孵育。方法:將大鼠腦解剖并在4% PFA中固定過夜，然后在30%蔗糖(在PBS中)中孵育直到下沉(大約。48小時)。在切片在1% NaBH4中孵育30分鐘之前，使用冷凍切片機切割40 μm水平切片。切片在0.05M甘氨酸、2% BSA和3%驢血清中封閉，然后在小清蛋白中孵育過夜HB6457(1:1000稀釋)和GFAPHB6406隨后用1∶300稀釋度的二抗(山羊抗小鼠生物素化抗體HB11345，山羊抗雞647，Invitrogen)孵育2小時。在PBST洗滌三次后，切片用鏈霉親和素AF488孵育HB13531在室溫下以1.0升/毫升的濃度持續2小時。DAPIHB0747以1克/毫升的濃度使用以顯現細胞核。欲了解更多詳情，請參閱我們的IHC協議。使用徠卡DMI6000B倒置落射熒光顯微鏡捕獲圖像。使用z堆疊中的20x物鏡拍攝圖像，曝光時間:A4: 57.803毫秒，GFP: 151.803毫秒，Y5: 599.044毫秒
圖3。大鼠海馬中鏈霉親和素AF488的濃度反應。
鏈霉親和素AF488用于檢測大鼠海馬中表達小清蛋白的中間神經元。鏈霉親和素AF488 (HB13531)在低至1 g/ml的濃度下產生強染色。方法:將大鼠腦解剖并在4% PFA中固定過夜，然后在30%蔗糖(在PBS中)中孵育直到下沉(大約。48小時)。在切片在1% NaBH4中孵育30分鐘之前，使用冷凍切片機切割40 μm水平切片。切片在0.05M甘氨酸、2% BSA和3%驢血清中封閉，然后在小清蛋白中孵育過夜HB6457(1∶1000稀釋度)在4℃下。隨后用1∶300稀釋度的第二抗體(山羊抗小鼠生物素抗體)孵育2小時HB11345).在PBST洗滌三次后，切片與1.0 g/mL、5.0 g/mL和10.0 gL/mL的鏈霉親和素AF488 (HB13531)在室溫下孵育2小時。DAPIHB0747以1克/毫升的濃度使用以顯現細胞核。有關更多詳情，請參閱我們的href = "/免疫組織化學-ihc-protocol"> IHC(IF)方案。使用徠卡DMI6000B倒置落射熒光顯微鏡捕獲圖像。使用z型堆棧中的20x物鏡拍攝圖像，曝光時間為:
1.0克/毫升:A4: 57.803毫秒，GFP: 151.803毫秒
5.0克/毫升:A4: 71.225毫秒，GFP: 381.278毫秒
10.0克/毫升:A4: 71.225毫秒，GFP: 401.056毫秒
圖4:大鼠海馬中表達小白蛋白的中間神經元
大鼠海馬染色HB6457檢測表達小清蛋白的中間神經元。使用抗小鼠生物素抗體(HB11345隨后用鏈霉親和素AF488 (HB13531)孵育。方法:將大鼠腦解剖并在4% PFA中固定過夜，然后在30%蔗糖(在PBS中)中孵育直到下沉(大約。48小時)。在切片在1% NaBH4中孵育30分鐘之前，使用冷凍切片機切割40 μm水平切片。切片在0.05M甘氨酸、2% BSA和3%驢血清中封閉，然后在小清蛋白中孵育過夜HB6457(1∶1，000稀釋度)在4℃下。隨后用1∶300稀釋度的山羊抗小鼠生物素抗體與第二抗體孵育2小時HB11345).在PBST洗滌三次后，切片在室溫下用1.0 L/mL的鏈霉親和素AF488 (HB13531)孵育2小時。DAPIHB0747以1克/毫升的濃度使用以顯現細胞核。欲了解更多詳情，請參閱我們的IHC協議。使用徠卡DMI6000B倒置落射熒光顯微鏡捕獲圖像。使用z-stack中的20x物鏡以tilescan的形式拍攝圖像，曝光時間:A4: 57.803毫秒，GFP: 524.211毫秒，Y3: 524.211毫秒
| 光譜相似的染料 | Alexa Fluor 488，Atto 488，DyLight 488，FITC |
生物數據
| 應用筆記 | #方案1:在IHC檢測生物素標記的抗體 1.在NaBH中孵育自由漂浮的大鼠腦切片(40 m)4)15分鐘，然后在封閉緩沖液(0.05M甘氨酸、2% BSA和3%驢血清)中2小時。 2.將切片與封閉緩沖液中的一抗一起在4℃孵育過夜，如我們的IHC議定書。 3.在PBST清洗切片三次，每次5分鐘。 4.用2 g/mL山羊抗小鼠生物素抗體孵育切片HB11345或山羊抗兔抗體HB11036室溫下在封閉緩沖液中稀釋2小時 5.在PBST清洗切片三次，每次5分鐘。 6.在封閉緩沖液中用1 g/mL鏈霉親和素AF488孵育切片2小時。 7.在PBST清洗切片三次，每次5分鐘。 8.用10克/毫升DAPI孵育切片10分鐘。 9.在dH中清洗切片2o，用固定介質固定在載玻片上，并用蓋玻片覆蓋。 10.使用488nm激光或GFP濾光片激發鏈霉親和素AF488，在顯微鏡上對切片成像。 |
溶解性和處理
| 重構建議 | 我們建議用1毫升以下物質復原:- dH2O并儲存在4°C
- dH2O與甘油的比例為50∶50，并儲存在-20℃下
- 然后將dH2O等分并儲存在-80℃下
打開時要小心，因為沉淀物輕，如果受到干擾很容易丟失。重構時，在以< 10，000g的速度短暫旋轉鏈霉親和素之前，確保通過上下移液溶解鏈霉親和素，以確保所有材料都被回收并位于試管底部。 |
| 存儲器緩沖區 | 復溶時包含含0.05%die**鈉和1%重組牛血清白蛋白的PBS。 |
| 重要的 | 本產品僅供研究使用，不用于治療或診斷用途。不適用于人類或獸醫 |
上海牧榮生物科技有限公司
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