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Hyclone DMEM高糖培養基SH30022.01
貨號:SH30022.01
規格:500ml
簡介:DMEM高糖液體培養基,不含丙酮酸鈉
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細胞培養基既是培養細胞中供給細胞營養和促使細胞生殖增殖的基礎物質,由于不同細胞來源不同的組織器官環境,其體外培養所需的養分不盡相同,選擇合適的培養基對細胞的培養至關重要。
如何選擇培養基
至于選擇何種培養基并沒有一定的標準,有幾點建議可供參考:
(1)建立某種細胞株所用的培養基應該是培養這種細胞shou選的培養基。
(2)其它實驗室慣用的培養基不妨一試,許多培養基可以適合多種細胞。
(3)根據細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養基。如小鼠細胞株多選RPMI1640 。
(4)用多種培養基培養目的細胞,觀察其生長狀態,可以用生長曲線、集落形成率等指標判斷,根據實驗結果選擇zui佳培養基,這是zui客觀的方法,但比較繁瑣。
培養基種類
經典的培養基有很多種,其中 DMEM、 RPMI 1640、 MEM、 DMEM/F12 都是應用zui廣泛的培養基。其他如 M199、 IMDM、 L15培養基等也用于某些細胞的培養。其具體的特征及應用如下:
1、BME細胞培養基
基礎Eagle培養基(Basal Medium Eagle),1955年Eagle設計,BSS+12種氨基酸+谷氨酰胺+8種維生素。簡單、便于添加,適于各種傳代細胞系和特殊研究用,在此基礎上改良的細胞培養基品種有MEM、DMEM、IMDM等。
2、MEM細胞培養基
又稱*Eagle培養基(Minimal Essential Medium),1959年在Eagle's基礎培養基(BME)上修改而來,刪去賴氨酸、生物素,氨基酸濃度增加,適合多種細胞單層生長,有可高壓滅菌品種,是一種zui基本、試用范圍zui廣的培養基,但因其營養成分所限,針對生產之特定細胞培養與表達時,并不一定是使用效果zui佳或者zui經濟的培養基。
3、DMEM細胞培養基
DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養基,起初是為小鼠成纖維細胞設計的。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。zui初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,后來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調整為4500 mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了。
低糖適于依賴性貼壁細胞培養,特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養。高糖更適合高密度懸浮細胞培養,也適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養,也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞的培養。例如CHO細胞表達生產乙肝疫苗、CHO細胞表達EPO。
4、IMDM細胞培養基
Guilber 和Iscove將Dulbecco' Medium 改良為 Iscove's Medium,用于培養紅細胞和巨噬細胞前體。此種培養液含有硒、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進小鼠B淋巴細胞,LPS刺激的B細胞,骨髓造血細胞,T細胞和淋巴瘤細胞的生長。IMDM為營養非常豐富的培養液,因此可以用于高密度細胞的快速增殖培養。
5、RPMI-1640細胞培養基
Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制,針對淋巴細胞培養設計,含BSS+21種氨基酸+維生素11種等。現也用于懸浮細胞培養,如哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞,雜交瘤細胞的培養,其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。
6、HamF10細胞培養基
1963年Ham設計,含微量元素,可在血清含量低時用,適用于克隆化培養。F10適用于倉鼠、人二倍體細胞,特適于羊水細胞培養。
7、DMEM/F12細胞培養基
Ham's F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的,現在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產物,這種培養基已應用于許多原代培養及更難養的細胞系的培養。由于營養成分豐富,且可以使用較少血清,故也常作為無血清培養基的基礎培養基。
8、M199細胞培養基
1950年Morgan等設計的具有確定化學成分的細胞培養液,即M-199。除BSS外,含有53種成分,為全面培養基,主要用于雞胚成纖維細胞培養。此培養液必須輔以血清才能支持長期培養。M-199可用于培養多種種屬來源的細胞,并能培養轉染的細胞。現廣泛用于病毒學、疫苗生產。
9、McCoy5A培養基
1959年MeCoy為肉瘤細胞設計,BSS+40種成分。可支持多種(如骨髓、皮膚、肺和脾臟等)的原代移植物的生長,除適于一般的原代細胞培養外,主要用于作組織活檢培養、一些淋巴細胞培養以及一些難培養細胞的生長支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細胞、人淋巴細胞、HT-29、BHL-100等上皮細胞。
10、L15 細胞培養基
L-15培養液適用于快速增殖瘤細胞的培養,用于在CO2缺乏的情況下培養腫瘤細胞株。此培養液采用磷酸鹽緩沖體系,氨基酸組成進一步改良,并由半乳糖替代了葡萄糖。
11、α-MEM細胞培養基
α-MEM培養基在MEM培養基基礎上添加了很多其他成分,適合培養比較難養的細胞。
12、Grace昆蟲培養基
zui初設計為支持澳大利亞白星橙天蠶蛾 (Antherea eucalypti) 細胞 的生長,是對Wyatt培養基的改良,以更接近 Antherea 血淋巴。Grace用這種培養基建立了di一個連續細胞系。適 當補充添加劑后,該基本培養基已用于培養各種昆蟲細胞,包括多種鱗翅類以及一些雙翅類昆蟲。Grace昆蟲細胞培養基主要作為 培養基基礎,用于培養Sf9 和Sf21細胞系,也用于其它鱗翅類昆蟲細胞系的生長和維持。
另外,為了使某些種類的細胞更好的生長,部分學者或廠家會對培養基的配方進行適當改良,衍生出一部分改良型的培養基。
同時,動物血清成分復雜,各種生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚。血清對細胞生長很有效,但后期對培養產物的分離、提純以及檢測造會成一定困難。另外高質量的動物血清來源有限,成本高,限制了它的大量使用。隨著細胞治療的興起,為了排除異體血清的影響,現在已經有不少適合間充質干細胞的無血清培養基面世(添加細胞生長有效因子、激素等)用于科研和臨床治療中的細胞培養。
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