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GEMINI胎牛血清(貨號:900-108)
GEMINI公司,成立于1985年,位于加利福尼亞南部Calabasas市,1999年,遷加利福尼亞北部Woodland市。Gemini公司在銷售的動物血清產品,全部來自于澳洲的子公司,血源主要為澳大利亞、新西蘭、巴拿馬、烏拉圭、巴西和阿根廷等。Gemini始終以“為客戶提供高質量產品”為首要目標,尤其在細胞培養用胎牛血清方面,Gemini產品質量好、價格低,和同類產品相比競爭力強。
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Gemini已登錄中國大陸,6年之久,Gemini血清已走進全國500多家實驗單位,以其好的質量、完善的售后,較低的價格,越來越被國內科研人員所認可。
GEMINI胎牛血清,素爾生物常備現貨之一:
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◆細胞培養中出現黑點是污染嗎?如何處理?
一旦您在細胞培養的過程中發現有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養基是否混濁。
然后,在鏡下觀察培養細胞生長的狀態,黑點是否游動。
如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。
◆如果在鏡下觀察細胞,生長狀態良好,與黑點出現前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現可能與以下幾種情況有關:
(1) 細胞生長過老,破碎的細胞殘骸;
(2) 血清質量不好,反復凍融的結果;
(3) 配制培養基的pH值偏高,不宜細胞生長;
(4) 配制培養基的水質、容器不合格??捎秒x心、過濾的方法去除這些黑點;
(5) 培養原代細胞中出現小黑點,可能是原代組織中的雜質,多次傳代可以消除。
◆有必要做熱滅活嗎?
熱滅活血清對大多數的細胞而言是不需要的。
◆小牛血清和胎牛血清有何區別與注意事項?
來源不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum,CS)采自出生10至14 天的小牛。
各成分占比不同:兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細胞必需胎牛血清才能生長,而有些細胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。
血清保存和使用須注意:血清應保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時 ,應先將血清至于2-8℃,并經常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會增加,血清在解凍和熱滅活后,應按用量分裝并于-20℃保存,避免反復凍融。
常見問題問答:
一、血清或培養基產生了顏色或沉淀的問題:
問:我用的是四季青的胎牛血清,56℃30分鐘滅活后出現了白色少量絮狀沉淀,是不是污染?還能不能 再用?血清的生產日期是2006年7月(現在是2007年6月11日)。
答:應該問題不大。你可以取少量血清放入培養皿中,37℃過夜培養看看就知道是否污染了。血清中沉淀 物的出現有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在 血渭解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質量。 若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。
二、懸浮細胞培養時能否加血清?如果加了會有什么結果?為什么懸浮細胞培養時就不能加血清?
答:血清是細胞培養基中重要的培養成份之一,對細胞生長有廣泛影響。在細胞培養時,我們通常會加入 10%的血清。血清的質量對細胞培養的成功至關重要。一般說來,牛血清包括以下成分:生長因子(如激素,白細胞介 素等),他們可以促進細胞生長;貼附因子,他們可以促進細胞的貼壁,往往只有細胞貼壁才能增值(懸浮培養的細胞 除外);蛋白質(如血清白蛋白,球蛋白等),既可以作為營養物質,又可以中止胰酶的作用;還有很多成分不明的物 質。血清還可以起到解毒作用,如脂肪酸、重金屬和某些蛋白酶的毒性。血清還可以是細胞免受機械損傷。因此,無 論是貼壁細胞還是懸浮細胞,血清是*的。除非因實驗要求無血清培養時,例如:為使細胞同步化時,我們會 采用無血清培養的。單純的說懸浮細胞培養不能加血清就沒有太多的道理了。
三、血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現,該如何處理:
答:血清中沉淀物的出現有許多種原因,但普的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成 凝血的蛋白之一)在血渭解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培 養基內一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
四、如何避免沉淀物的產生?
答:我們建議您在使用血清的時候,注意下列的操作 :
(1)解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃ 至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。
(2)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。
(3)請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分也會 因此受到損害,而影響血清的質量。
(4)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
(5)若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30 分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖 晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
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