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Gibco羊水培養(yǎng)基11269-026現(xiàn)貨
產(chǎn)品名稱:羊水培養(yǎng)基
產(chǎn)品貨號(hào):11269-016
品牌:Gibco
規(guī)格:100ml
儲(chǔ)存溫度:-20度
Gibco羊水培養(yǎng)基11269-026現(xiàn)貨注意事項(xiàng):
1、如發(fā)現(xiàn)包裝破損泄露、產(chǎn)品顏色不是橙紅色-紅色,請(qǐng)勿使用;
2、短期內(nèi)可放4度保存,若長期儲(chǔ)存,應(yīng)放-20度保存,不可以反復(fù)凍融哦!
3、實(shí)驗(yàn)操作的溫度一般控制再26度以上,濕度保持再70%為佳;
4、本品只可用于臨床與科研,不得用于其他。
關(guān)于血清的熱滅活,是很多人感興趣也存在一定爭議的話題。大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室將血清的熱滅活還是作為常規(guī)來執(zhí)行,因?yàn)橛袃蓚€(gè)作用,一是滅活補(bǔ)體,第二是滅活血清中可能存在的支原體。但是實(shí)驗(yàn)者并沒有考慮熱處 理對(duì)血清中的生長因子、氨基酸等成分帶來的負(fù)面影響。
我在實(shí)驗(yàn)室處理血清的時(shí)候,有一次水浴箱在滅活過程中出現(xiàn)故障,溫度升高到80℃,血清變成了凝膠狀 ,我重新處理了另外一份血清,將兩份血清對(duì)比,發(fā)現(xiàn)高溫直接影響到血清所含的抗體蛋白。在56℃下滅活半小時(shí)以 上,肯定也會(huì)對(duì)里面的蛋白起到破壞作用。下次有機(jī)會(huì)我做個(gè)延長滅活時(shí)間的實(shí)驗(yàn)試試,看看到底有多大的影響。熱 滅活之后,血清放在四度冰箱久了,就會(huì)有沉淀產(chǎn)生,這常常會(huì)被認(rèn)為是微生物污染或者是黑膠蟲污染。為了驗(yàn)證到 底有沒有污染,常常又會(huì)把血清放置37℃溫育,但是血清中的蛋白會(huì)進(jìn)一步析出,后還是要做鏡檢,無菌培養(yǎng)試驗(yàn) ,和革蘭氏染色試驗(yàn),非常麻煩。
GIBCO羊水培養(yǎng)基 我看過一份資料,里面提到70%的實(shí)驗(yàn)者認(rèn)為滅活是理所當(dāng)然的。常規(guī)滅活建議的溫度在45℃到62℃之間, 而時(shí)間則從15分鐘到60分鐘不等。其中常用的手法是56℃熱處理30分鐘。隨著血清采集、處理、加工工藝的提高 ,許多早先認(rèn)為是熱滅活的原因已經(jīng)不再成立,只有少數(shù)對(duì)血清進(jìn)行熱滅活的研究者在實(shí)驗(yàn)中證實(shí)了這一步驟的有效 性和必要性。有人比較過11個(gè)不同細(xì)胞株,發(fā)現(xiàn)其中熱滅活對(duì)6 個(gè)細(xì)胞株(HBAE,MDBK,Vero,成纖維細(xì)胞,MRC-5) 的生長帶來負(fù)面影響,三個(gè)細(xì)胞株(FOX-NY,MDCK和CHO-K1)不受熱滅活的影響,而只有兩個(gè)細(xì)胞株(Balb/3T3, Sp2/0Ag14 hybrid),在熱滅活之后,細(xì)胞生長有輕微的改善。所以,在正常的操作下,熱滅活通常對(duì)細(xì)胞的生長沒 有明顯的促進(jìn)作用。
你可以摸索一下,血清從-20℃冰箱拿出來之后在常溫解凍,然后混勻分裝成兩份,一份滅活,一份不滅活 ,比較這兩種血清對(duì)細(xì)胞是否有影響。然后再確定是滅活還是不滅活。這個(gè)過程多也就一個(gè)星期。同時(shí)你還要考慮 血清滅活與否對(duì)你后續(xù)的實(shí)驗(yàn)有沒有影響。
11269-026羊水培養(yǎng)基
血清功能
※
提供生長激素、營養(yǎng)物,以及低分子營養(yǎng)物
提供結(jié)合蛋白
能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力
是細(xì)胞貼壁、鋪展生長所需因子的來源
起酸堿度緩沖液作用
提供蛋白酶抑制劑
細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受損傷
能與有毒金屬和熱源物質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用
※
血清分類
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胎牛血清:八月齡胎牛心臟穿刺取血
新生牛血清:出生12-24小時(shí)新生牛靜脈采血
小牛血清:出生三月齡小牛動(dòng)脈采血分離血清
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血清要求
※
血清來源
來自國內(nèi)非疫區(qū),有說明血清來源的證明資料:包括收集過程的全部資料、檢驗(yàn)結(jié)果和交付情況。
血清收集
胎牛血清是心臟穿刺取血,新生牛(10~14天)和小牛(10個(gè)月內(nèi))血清靜脈取血。血清在低溫下采集、一次分離、分離后立即混合凍存,符合工業(yè)生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)。
血清制備
1、熱滅活血清(非必須)
2、γ-射線照射:γ-射線照射可以有效滅活血清中可能污染的病毒、支原體。
3、除菌過濾:胎牛血清要通過三層100nm過濾。
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