Gibco胰酶25200-056|暑期特惠

產品名稱：胰酶

品牌：Gibco

貨號：25200-056

規格：100ml

備注：-20度

蘇州千舍批發供應hyclone液體培養基，Gibco胎牛血清，無外泌體血清，Gibco液體培養基，hyclone雙抗，Gibco胰酶，SERANA胎牛血清

GIBCO雙抗 15140-122  100ml

GIBCO胰酶 25200-056  100ml

GIBCO胰酶25200-072   500ml

Hyclone 雙抗 SV30010   100ml

Hyclone 胰酶 SH30042.01 100ml

暑期大促，除25200-072外，以上雙抗胰酶

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雙抗會使您寶貴的培養細胞免受污染

研究者一般需要考慮兩種細胞培養污染：微生物細胞培養污染和其他細胞系的混入。 兩種污染都非常普遍，必須重視可能的污染以及污染對結果造成的影響。 應根據各個研究者的需求和經驗來決定是否使用抗生素和抗真菌劑來防止污染。
我們生產了種類繁多的抗生素和抗真菌劑來控制細菌、真菌、支原體和酵母所造成的污染。 研究者嘗試使用抗生素或抗真菌劑來消除或控制污染時，必須要清楚對于特定的細胞系這些物質可能是具有毒性的。 使用前，首先進行劑量反應胰酶是一種蛋白酶。通過在特定位置上降解蛋白，使細胞間結合處蛋白降解，這時細胞由于自身內部細胞骨架的張力作用下成為球形，從而使細胞分開。

      不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關，在pH為8.0、溫度為37℃時，胰酶溶液的作用能力強。使用胰酶時，應把握好濃度、溫度和時間，以免消化過度造成細胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質克降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液時應選用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。終止消化時，可用含有血清培養液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細胞的作用。

   胰酶本身就是消化蛋白的，而細胞膜又富含各種膜蛋白，消化過頭會對細胞造成損傷的。
雙抗通常情況下在-20℃保存一年。由于該試劑在4℃下長期存放是不穩定的，應分裝后在-20℃下避光保存。青霉素在2-8的℃存放時間不應超過4天，鏈霉素相對穩定一點，在2-8℃可以存放30天左右。切記，雙抗從凍融后里面的基本成分已開始降解。

Gibco胰酶25200-056|暑期特惠購買蘇州千舍細胞注意事項：

　　一、客戶收到細胞先不開蓋，放在培養箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議受收細胞時的培養基拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；

　　收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。

　　二、如為貼壁細胞，請在顯微鏡下觀察細胞密度：

　　1. 未超過80%匯合度時，用75%酒精（建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水，噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作；然后打開蓋子，先把培養基吸出10ml左右，放在離心管里，然后瓶口過火（嚴禁直接傾倒），這樣可以保證不污染，再用10ml的移液管，將剩余的培液全部吸出，放于離心管中，培養瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養16hr(時間根據細胞生長情況調整）之后，傳代或者凍存。

　　2. 超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。具體步驟如下：

　　1) 棄去培養液，用3ml PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次；

　　2) 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于T25培養瓶中，倒轉放于37度培養箱1-3分鐘預熱，然后又將培養瓶倒轉大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養培養瓶，細胞隨即脫落下來；

　　3) 加入6-8ml*培養基，吸出，分到新的培養瓶中，按要求分瓶。

　　三、如為懸浮細胞，吸出培養液，1000轉/分鐘離心5分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。

　　注意：換液時一半用我們的培養基，一半用你們的，以免細胞不適應而造成生長不好。

　　四、細胞出現問題，可重發的情況有哪些？判定標準是什么？

　　（1）細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、破損、漏液等，重發；

　　（2）凍存的細胞復蘇后，絕大多數細胞未存活，重發；

　　（3）存活的細胞靜置24小時后，絕大多數細胞未存活，重發；

　　（4）凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封，出現污染，重發；

　（5）視具體情況而定。

　　五、細胞出現問題，不予以重發的情況有哪些？

　 （1）客戶造成細胞污染，不重發；

　　（2）客戶不正確操作致細胞狀態不好，不重發；

　　（3）細胞狀態不好，未提供細胞培養前3天照片的，不重發；

　　（4）細胞培養時經其它處理的，不重發；

　　（5）細胞收到2天內，未告知，不重發；

　　（6）視具體情況而定。

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Gibco緩沖液 PBS7.4 貨號：C10010500BT

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★Hyclone培養基:SH30021.01、SH300243.01、SH30265.01、SH30256.01 

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