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土壤木質(zhì)素過氧化物酶（S-LiP）洗滌方法
閱讀：1157 發(fā)布時間：2021-9-11. 自動洗板機：每孔加入洗滌液350μl，注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350μl，浸泡1-2分鐘，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體，在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫；試劑或樣品配制時，均需充分混勻，并盡量避免起泡。
1.加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。給酶標(biāo)板覆膜，37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體，甩干，每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制)，酶標(biāo)板加上覆膜，37℃溫育1小時。
3.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時。
5.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長，但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時，即可終止)。
7.每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源，預(yù)熱儀器，設(shè)置好檢測程序。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。
蝮蛇蛇毒蛋白抗體
轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體
內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪氨酸激酶抗體
酪氨酸蛋白激酶受體B2抗體
磷酸化雌激素受體ER alpha 抗體
重組增強型綠色熒光蛋白抗體
雌激素受體α抗體
雌激素受體α/β抗體
自分泌運動因子抗體
酪氨酸蛋白激酶A3受體抗體
EHM2蛋白抗體
磷酸化真核翻譯起始因子4E抗體
翻譯延伸因子EF-1a抗體
磷酸化雌激素受體α抗體
磷酸化表皮生長因子受體抗體
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體
酪氨酸蛋白激酶受體B4抗體
酪氨酸蛋白激酶A5受體抗體
上皮鈉離子通道蛋白γ/γENaC抗體
癌基因ETS2抗體
內(nèi)皮素3抗體
磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶5抗體